電針「足三里」が大腸癌移植腫瘍マウスの5-FU化学療法後の結腸粘膜損傷およびNF-κB、AQP8蛋白に与える影響の緩和

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

目的は、電針「足三里」が大腸がん移植腫瘍マウスの5-フルオロウラシル(5-FU)化学療法後の結腸粘膜損傷、核因子κB(NF-κB)および水チャネル蛋白8(AQP8)蛋白に与える影響を観察し、その可能な作用機序を検討することである。方法は、BALB/cマウスに大腸がん細胞株CT26を皮下に注射し、大腸がん移植腫瘍動物モデルを作製した。腫瘍体積が100~300 mm3に達した時点で、造模に成功したマウスを荷腫瘍群、化学療法群および化学療法+電針群に無作為に分け、各群6匹とした。さらに、正常なBALB/cマウス6匹を正常群とした。化学療法群および化学療法+電針群では、分けた当日から腹腔内に5-FU溶液(50 mg/kg、0.01 mL/g)を1日1回、5日間投与した。化学療法+電針群のマウスには、化学療法後すぐに両側の「足三里」に周波数2 Hz、強度1~2 mAの連続波で5分間ずつ電針を施した。実験期間中、毎日マウスの疾病活動指数(DAI)を評価し、介入期間中毎日1回腫瘍体積を測定した。組織採取後に腫瘍量および結腸長を測定し、HE染色法で結腸組織の形態を観察した。血清中のジアミンオキシダーゼ(DAO)およびD-乳酸(D-LA)含量をELISAで検出し、免疫組織化学法で結腸AQP8蛋白の発現を検査し、免疫蛍光法で結腸のNF-κBの核移行を検出し、Western blot法で結腸NF-κBおよびAQP8蛋白の発現レベルを測定した。結果は、正常群と比較して荷腫瘍群では各指標に統計的有意差は認められなかった。荷腫瘍群と比較して化学療法群はDAIが上昇し(P<0.05)、結腸長、腫瘍体積および腫瘍量が減少し(P<0.05)、血清DAOおよびD-LA含量が増加し(P<0.05)、結腸NF-κB蛋白の発現と核移行が増加し(P<0.05)、結腸組織中のAQP8蛋白発現レベルが低下した(P<0.05)。化学療法群と比較して化学療法+電針群はDAIスコアおよび血清DAO、D-LA含量が低下し(P<0.05)、結腸NF-κB蛋白発現および核移行が減少し(P<0.05)、結腸組織のAQP8蛋白発現レベルが増加した(P<0.05)。HE染色の結果、正常群と荷腫瘍群の結腸組織構造に異常はなく、化学療法群では結腸組織に腺窩構造の破壊や炎症細胞浸潤などの病理的損傷が見られた。化学療法群と比較して化学療法+電針群では結腸絨毛の長さが増し、組織細胞の配列乱れが改善され、炎症細胞の浸潤が軽減した。結論として、電針「足三里」はNF-κBシグナル経路の過剰活性化を抑制し、AQP8蛋白の発現を上方調節し、腸粘膜損傷を減少させ、DAOおよびD-LAの放出を低減することで腸管バリア機能を維持できる。

关键词

電針;移植性結直腸癌;5-フルオロウラシル;腸粘膜損傷;結腸組織;核因子κB;水チャネル蛋白8

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