Piezo1イオンチャネルに基づく電気針感作“三陰交”による原発性月経困難症ラット改善の効果機序の検討

WEI Yan-rong ,  

ZI Yan ,  

PENG Yu-ting ,  

ZHANG You ,  

ZHOU Jin ,  

TANG Yi-wen ,  

XUE Xiao ,  

YUE Zeng-hui ,  

摘要

目的は、電気針刺激による“三陰交”の感作が原発性月経困難症(PDM)を改善する効果機序を検討し、電気針効果における圧電タンパク質1(Piezo1)の役割に着目することである。方法:雌のラット60匹を無作為に空白群(10匹)およびモデル作成群(50匹)に分けた。von Frey電子痛み計を用いて左側“三陰交”穴部の機械的疼痛閾値を測定し、機械的疼痛閾値変化率に基づいてモデル高感作群、モデル低感作群、電気針高感作群、電気針低感作群を各10匹ずつ選定した。ベンゾイン酸エストラジオールとオキシトシンの併用注射でPDMラットモデルを作成した。両電気針群には“三陰交”に対して50Hz、密波、1日20分、連続5日間の電気針刺激を施行した。腹部のねじれ反応を記録し疼痛程度を評価し、レーザースペックルイメージングで子宮血流量を観察し、HE染色でラットの子宮組織病理形態を観察した。メチレンブルー染色で“三陰交”穴部肥満細胞脱顆粒率を観察し、透過型電子顕微鏡で子宮組織細胞の超微細構造を観察した。ELISA法で血清および子宮均質液中の前立腺素E₂(PGE₂)、前立腺素F₂α(PGF₂α)、血清腫瘍壊死因子-α(TNF-α)含量を検出し、Western blot法で“三陰交”穴部Piezo1、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、トリプターゼ(Tryptase)、子宮Piezo1タンパク質発現を検出した。免疫蛍光法で“三陰交”穴部CGRP、Tryptase発現を検出し、qPCR法で子宮Piezo1およびシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)mRNA発現を測定した。結果は、空白群と比較してモデル高感作群およびモデル低感作群でねじれ回数およびねじれスコアが増加し(P<0.01)、ねじれ潜伏期が出現し(P<0.01)、子宮血流灌流量が低下し(P<0.01)、子宮病理スコアが上昇し(P<0.01)、肥満細胞脱顆粒率が上昇し(P<0.01)、血清および子宮中のPGF2α含量、血清TNF-α含量およびPGF2α/PGE2比が有意に上昇し(P<0.01)、血清および子宮中のPGE2含量は有意に低下し(P<0.01)、穴部Piezo1、CGRP、Tryptaseタンパク質発現、子宮Piezo1、COX-2 mRNA発現およびPiezo1タンパク質発現が上昇し(P<0.01)、子宮組織に超微細構造変化がみられた。電気針高感作群はモデル高感作群と比較し、電気針低感作群はモデル低感作群と比較して、両電気針群でこれら指標が逆転した(P<0.01、P<0.05)。電気針低感作群と比較し、電気針高感作群は指標の改善においてより顕著な効果を示した(P<0.01)。結論:電気針の異なる感作状態の“三陰交”はPDMラットの疼痛を効果的に緩和し、電気針高感作群の効果がより優れていた。このメカニズムは穴位の感作状態依存性があり、穴部Piezo1の発現を調節し、肥満細胞の脱顆粒および神経性炎症反応を抑制し、子宮Piezo1/COX-2/PGs経路のタンパク質発現を下方調節し、炎症因子の放出を抑制することで鎮痛作用を発揮すると考えられる。 【キーワード】 電気針;“三陰交”;原発性月経困難症;圧電タンパク質1;穴位感作

关键词

電気針;三陰交 (SP6);原発性月経困難症;Piezo1;穴位感作

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