目的は「醒脳開竅」鍼治療法が脳中大動脈閉塞/再灌流（MCAO/R）ラットの大脳皮質虚血半影（IP）領域における環状アデノシン一リン酸調節グアニンヌクレオチド交換因子1（Epac1）/ラットサルコーマ関連タンパク質1（Rap1）シグナル経路への影響を観察し、この鍼治療法が血液脳関門（BBB）を修復することにより虚血再灌流損傷（CIRI）を軽減する分子的メカニズムを検討することである。方法として、84匹の雄性SDラットを偽手術群、モデル群、鍼治療群、鍼治療+ESI-09（Epac1阻害剤）群にランダムに分け、各群21匹ずつとした。偽手術群を除き、他の群は改良Longa糸塞栓法により右側MCAO/Rモデルを作成した。鍼治療群には「水溝」と両側「内関」に「醒脳開竅」鍼治療法を施し、鍼治療+ESI-09群は再灌流後に腹腔内注射でESI-09（10 mg/kg）を投与し、同法で鍼治療を行った。レーザースペックル血流画像装置で脳血流（虚血前、虚血2時間、虚血後2時間再灌流）をモニタリングした。改良Bedersonスコアで神経機能欠損を評価した（再灌流24時間後）。三フェニルテトラゾリウム塩（TTC）染色法で脳梗塞体積の百分率を測定した。湿潤乾燥重量法で右脳の含水量を測定した。エバンスブルー（EB）染色法で右大脳皮質BBB透過性を評価した。Western blotおよびリアルタイム定量PCR法で右大脳皮質IP領域のEpac1、Rap1タンパク質およびmRNA発現を検出した。免疫蛍光染色法で右大脳皮質IP領域におけるF-アクチン（F-actin）と血小板内皮細胞接着分子（CD31、内皮細胞マーカー）の蛍光共局在面積比を検出した。透過型電子顕微鏡で右大脳皮質IP領域のBBB超微構造を観察した。結果は偽手術群を除く各群において虚血後の脳血流量がベースラインの70 %以下に低下し、2時間の再灌流後にベースラインの70 %以上に回復し、モデルが成功したことを示した。再灌流24時間後、偽手術群と比較してモデル群は神経機能スコア、梗塞体積百分率、脳含水量およびEB含量が上昇し（P<0.01）、右大脳皮質IP領域のEpac1、Rap1タンパク質およびmRNA発現は低下し（P<0.05、P<0.01）、F-actinとCD31の共局在面積比は上昇し（P<0.01）、BBB基底膜は不明瞭で断続的であり、密着結合（TJ）は局所的に溶解または欠失していた。モデル群と比較して鍼治療群の損傷指標は全て改善し（P<0.01）、右大脳皮質IP領域のEpac1、Rap1タンパク質およびmRNA発現は上昇し（P<0.01）、F-actinとCD31の共局在面積比は減少し（P<0.01）、BBB基底膜は連続し、TJ構造は緻密であった。鍼治療群と比較して鍼治療+ESI-09群は損傷指標が回復し（P<0.01）、右大脳皮質IP領域のEpac1、Rap1タンパク質およびmRNA発現は低下し（P<0.01）、F-actinとCD31の蛍光共局在面積比は上昇し（P<0.01）、BBB基底膜は依然として不明瞭でTJ領域は溶解していた。結論として、「醒脳開竅」鍼治療法は大脳皮質IP領域のEpac1/Rap1経路を調節して血管内皮細胞骨格の再編を誘導し、CIRI後のBBB損傷を軽減する。

鍼治療;Epac1/Rap1シグナル経路;血液脳関門;脳虚血再灌流障害;血管内皮細胞骨格再編