目的は、鍼刺激「内関」がバルプロ酸（VPA）誘導による自閉症スペクトラム障害（ASD）様子ネズミの行動障害、神経細胞損傷および神経炎症反応の改善作用を検討することである。方法として、妊娠したSDラットを無作為に対照群とモデル群に分け、モデル群では妊娠12.5日目に腹腔内にVPA（600 mg/kg）を注射し子孫のASDモデルを構築した。子孫の幼獣を正常群、モデル群、偽鍼群、鍼群、溶媒群および陽性薬群に無作為に分け、各群9匹ずつとした。鍼群は幼獣生後7日目から毎日両側「内関」に鍼刺激を行い、週6日間、計15日間介入した。介入終了後、水迷路試験、三箱社交試験、自発的毛づくろい行動試験を実施した。ヘマトキシリン・エオジン染色およびゴルジ染色で海馬神経細胞形態および樹状突起棘密度を観察し、Western blot法で海馬のシナプス関連タンパク質PSD95、GAD67、VGATおよび細胞焦亡関連タンパク質NLRP3、GSDMD-NT、活性型カスパーゼ-1の発現を検出した。ELISA法で海馬組織中のインターロイキン-1β（IL-1β）、インターロイキン-18（IL-18）含量および乳酸脱水素酵素（LDH）活性を測定し、蛍光プローブ法で海馬活性酸素（ROS）レベルを検出し、免疫蛍光染色で海馬ミクログリア活性化マーカーIba1陽性発現を観察し、TUNEL染色で海馬細胞アポトーシスを検出した。結果は正常群と比較し、モデル群の幼獣は体重低下（P<0.01、P<0.05）、回避潜時延長（P<0.01、P<0.001）、元のプラットフォーム横断回数および目標象限滞留時間減少（P<0.01、P<0.001）、社会性指数および社会的嗜好低下（P<0.05、P<0.001）、自発的毛づくろい回数増加（P<0.001）、海馬神経細胞並び乱れおよび樹状突起棘密度低下（P<0.001）、ROSレベル、LDH活性およびIL-1β、IL-18含量上昇（P<0.001）、PSD95、NLRP3タンパク発現およびGSDMD-NT/GSDMD、活性型カスパーゼ-1/プロカスパーゼ-1比率上昇（P<0.001）、GAD67、VGATタンパク発現低下（P<0.001）、Iba1陽性細胞数およびアポトーシス率増加（P<0.001）であった。モデル群と比較し、鍼群および陽性薬群は体重増加（P<0.05）、回避潜時短縮（P<0.01、P<0.001、P<0.05）、目標象限滞留時間増加（P<0.05）、社会性指数および社会的嗜好増加（P<0.05、P<0.01）、自発的毛づくろい回数減少（P<0.05、P<0.01）、樹状突起棘密度増加（P<0.05、P<0.001）、ROSレベル、LDH活性およびIL-1β、IL-18含量減少（P<0.001、P<0.01）、PSD95、NLRP3発現およびGSDMD-NT/GSDMD、活性型カスパーゼ-1/プロカスパーゼ-1比率減少（P<0.05、P<0.001、P<0.01）、GAD67、VGAT発現増加（P<0.001、P<0.05）、Iba1陽性細胞数およびアポトーシス率減少（P<0.05、P<0.01、P<0.001）であった。陽性薬群は鍼群よりも回避潜時が短縮しており（P<0.05）、ROSレベル、PSD95、NLRP3、GAD67、VGAT発現および活性型カスパーゼ-1/プロカスパーゼ-1比率が減少し（P<0.01、P<0.05）、アポトーシス率も減少した（P<0.05）。鍼群は偽鍼群より、陽性薬群は溶媒群よりも体重が増加し（P<0.05）、回避潜時が短縮し（P<0.05、P<0.01、P<0.001）、元のプラットフォーム横断回数および目標象限滞留時間が増加し（P<0.05、P<0.01）、社会性指数および社会的嗜好が増加し（P<0.05）、自発的毛づくろい回数が減少し（P<0.05、P<0.01）、樹状突起棘密度がいずれも増加し（P<0.05、P<0.001）、ROSレベル、LDH活性およびIL-1β、IL-18含量が減少し（P<0.01、P<0.001）、PSD95、NLRP3発現およびGSDMD-NT/GSDMD、活性型カスパーゼ-1/プロカスパーゼ-1比率が減少し（P<0.05、P<0.001、P<0.01）、GAD67、VGAT発現が増加し（P<0.001、P<0.01、P<0.05）、Iba1陽性細胞数およびアポトーシス率が減少した（P<0.01、P<0.001）。結論として、鍼刺激「内関」はVPA誘導ASD様幼獣の社会性欠損、反復的常同行動および認知障害を改善でき、その機序は海馬神経細胞損傷の軽減、シナプス蛋白発現バランスの調節、酸化ストレスおよびNLRP3炎症体介在神経炎症反応の抑制に関与すると考えられる。

鍼刺激;自閉症;社会性欠損;反復的常同行動;認知障害;海馬;神経炎症反応;酸化ストレス;シナプス可塑性