経穴埋線療法によるAMPK/SIRT1/PGC-1α経路の調節が単純性肥満ラットの腸内菌叢および炎症反応に及ぼす影響

Li Yong ,  

Ruan Chongjie ,  

Wang Wenyan ,  

Li Pei ,  

Liang Fengxia ,  

摘要

目的は、単純性肥満ラットにおける経穴埋線療法が腸内細菌叢、炎症反応および関連する作用機序に与える影響を探究することである。方法:実験にはSDラットを用い、高脂肪飼料を給餌して単純性肥満モデルを誘導し、モデル群、オルリスタット群、埋線群、AICAR群、埋線+Compound C群にランダムに分け、それぞれ8匹ずつとした。さらに8匹のSDラットを対照群とした。埋線群では、「中脘」「関元」「足三里」「豊隆」の経穴を選び、1週間に1回、4週間連続して埋線操作を行った。オルリスタット群のラットには0.048 g/kgのオルリスタットを腹胃管で1日1回、4週間投与した。AICAR群では、尾静脈注射で50 mg/kgのAMPK活性化剤AICARを1日1回、4週間注射した。埋線+Compound C群では、埋線操作と同時に尾静脈からAMPK阻害剤Compound Cを250 μg/kg注射した。ラットの体重、体長を測定し、Lee's指数を計算した。空腹時血糖(FPG)、空腹時インスリン(FINS)を測定し、インスリン抵抗性指数を算出した。生化学分析装置で血清総コレステロール(TC)、トリグリセリド(TG)、低密度リポタンパクコレステロール(LDL-C)、高密度リポタンパクコレステロール(HDL-C)を測定した。ELISA法で血清中の腫瘍壊死因子α(TNF-α)、インターロイキン6(IL-6)、エンドトキシン(LPS)、インターロイキン10(IL-10)を測定した。HE染色により結腸組織の病理変化を観察した。免疫蛍光法で結腸組織の閉鎖タンパク質(Occludin)、タイトジャンクションタンパク質1(Claudin 1)の陽性発現を検出した。PCR法で腸内菌叢の豊富度を検出した。Western blot法で結腸および脂肪組織におけるSIRT1およびPGC-1αタンパク質の発現を検出した。結果:対照群と比較すると、モデル群では体重、Lee's指数、血清中のTC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6、LPS、FPG、FINSおよびインスリン抵抗性指数、腸内のEnterococcus属およびDesulfovibrio属の豊富度が有意に上昇した(P<0.05)。一方、血清中のIL-10およびHDL-Cの含量、Bifidobacterium属、Lactobacillus属、Akkermansia属の豊富度、結腸組織のOccludinおよびClaudin 1の蛍光強度、結腸および脂肪組織のp-AMPK/AMPK比、SIRT1およびPGC-1αのタンパク質発現量は低下した(P<0.05)。モデル群と比較して、オルリスタット群、埋線群およびAICAR群では体重、Lee's指数、血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6、LPS、FPG、FINSおよびインスリン抵抗性指数、Enterococcus属およびDesulfovibrio属の豊富度が有意に減少し(P<0.05)、血清IL-10およびHDL-Cの含量、Bifidobacterium属、Lactobacillus属、Akkermansia属の豊富度、結腸組織のOccludinおよびClaudin 1の蛍光強度、結腸および脂肪組織のp-AMPK/AMPK比、SIRT1およびPGC-1αタンパク質発現量は有意に増加した(P<0.05)。埋線群と比較して、埋線+Compound C群では体重、Lee's指数、血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6、LPS、FPG、FINSおよびインスリン抵抗性指数、Enterococcus属およびDesulfovibrio属の豊富度が有意に増加し(P<0.05)、血清IL-10およびHDL-Cの含量、Bifidobacterium属、Lactobacillus属、Akkermansia属の豊富度、結腸組織のOccludinおよびClaudin 1の蛍光強度、結腸および脂肪組織のp-AMPK/AMPK比およびSIRT1およびPGC-1αタンパク質の発現量は低下した(P<0.05)。結論:経穴埋線療法は単純性肥満ラットの全身性低度炎症反応を軽減し、脂質代謝を調節し、有益な腸内細菌の豊富度を調節し、腸管バリア機能を修復でき、その作用機転はAMPK/SIRT1/PGC-1α経路に関与している可能性がある。

关键词

経穴埋線療法;単純性肥満ラット;炎症反応;腸内菌叢;AMPK/SIRT1/PGC-1α経路

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