異なる時間点の電気鍼介入が脳虚血再灌流傷害ラットの銅依存性細胞死関連タンパク質および銅恒常性に与える影響

Wang Yufei ,  

Meng Jia ,  

Huang Liujiao ,  

摘要

目的は、急性虚血性脳卒中(IS)ラットの脳虚血再灌流障害(CIRI)後の虚血半暗帯領域における銅依存性細胞死関連タンパク質およびCu2+含有量に対する異なる時間点での電気鍼介入の影響を観察し、鍼刺による銅依存性細胞死抑制がCIRIラットの神経機能を改善する作用機序および異なる施術時間がCIRIラットの神経機能障害改善効果に及ぼす影響を検討することである。SDラットを偽手術群、モデル群、0h電気鍼群、24h電気鍼群、48h電気鍼群の5群にランダムに分け、各群12匹ずつとした。Longa糸塞栓法により大脳中動脈閉塞/再灌流(MCAO/R)モデルを作製した。各電気鍼群はモデル作製後、再灌流24時間後にそれぞれ0、24、48時間で「百会」「風府」に30分間電気鍼を施した。改良神経機能欠損スコア(mNSS)により神経機能障害の回復を評価し、TTC染色で脳梗塞体積を検出し、比色法で虚血半暗帯脳組織のCu2+含有量を測定し、リアルタイム蛍光定量PCRおよびWestern blot法により虚血半暗帯脳組織の鉄酸化還元タンパク質1(FDX1)、ジヒドロリポイル転移酵素(DLAT)、リポ酸合成酵素(LIAS)、溶質キャリアファミリー31メンバー1(SLC31A1)のmRNAおよびタンパク質発現を検出した。偽手術群と比較して、モデル群はmNSSスコア、脳梗塞体積、虚血半暗帯脳組織のCu2+含有量、DLATおよびSLC31A1のmRNAおよびタンパク質発現が有意に上昇し(P<0.01)、FDX1およびLIASのmRNAおよびタンパク質発現は有意に低下した(P<0.01)。モデル群と比較して各電気鍼群はmNSSスコア、脳梗塞体積、Cu2+含有量、DLATおよびSLC31A1のmRNAおよびタンパク質発現が低下し(P<0.01、P<0.05)、FDX1およびLIASのmRNAおよびタンパク質発現が上昇した(P<0.01、P<0.05)。24hおよび48h電気鍼群と比較して0h電気鍼群はmNSSスコア、脳梗塞体積、Cu2+含有量、DLATおよびSLC31A1のmRNAおよびタンパク質発現が低下し(P<0.05、P<0.01)、FDX1およびLIASのmRNAおよびタンパク質発現が上昇した(P<0.01、P<0.05)。24h電気鍼群は脳梗塞体積、Cu2+含有量、DLAT、SLC31A1、FDX1およびLIASのmRNA発現で48h電気鍼群を上回った(P<0.01、P<0.05)。結論として、電気鍼介入はCIRIにおいて銅依存性細胞死を効果的に抑制し脳損傷を軽減し、早期の電気鍼介入がCIRIの神経機能損傷改善により良い効果をもたらす可能性がある。その機序はFDX1、DLAT、LIAS、SLC31A1の発現を調節し、脳組織のCu2+含有量を低下させることで神経細胞の銅依存性細胞死を抑制することに関連していると考えられる。

关键词

電気鍼; 脳虚血再灌流傷害; 鉄酸化還元タンパク質1; 銅依存性細胞死; 早期介入

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