電気鍼によるHippo/YAP経路調節を介した機能性消化不良ラットの十二指腸軽度炎症反応改善機序

Liang Tingting ,  

Zhao Yu ,  

Wang Tianlang ,  

Zhang Jiahao ,  

Wang Xihan ,  

Wang Xining ,  

Feng Yifan ,  

Guo Yue ,  

Liu Yunxiao ,  

Qu Yi ,  

Xue Yanan ,  

Liu Jidong ,  

摘要

目的:電気鍼刺激の「太衝」「足三里」がHippo/Yes関連タンパク質(YAP)経路を調節することにより、機能性消化不良(FD)モデルラットの十二指腸における軽度炎症反応を改善する作用機序を明確にすること。方法:雄性SDラットをランダムに対照群、モデル群、電気鍼群に分けた(n=7)。複合誘導法によりFDモデルを確立し、強制泳法、尾部刺激、摂食異常処理を同期的に21日間実施した。電気鍼群には「太衝」「足三里」への電気鍼刺激を1日1回20分、連続6日治療を2周期(中間に1日間隔)行った。モデル化および治療期間中に各群ラットの一般状態および体重変化を観察し、治療終了後に3時間摂食量、胃内容排出率、小腸推進率を測定した。十二指腸のHE染色により粘膜病理変化を観察し、ELISAにて血清中のモチリン(MTL)、ガストリン(GAS)含有量を測定、Western blotで十二指腸組織内のYAP、PDZ結合モチーフを持つ転写共活性化因子(TAZ)、リン酸化(p)-YAP、p-TAZタンパク質発現を検出した。免疫組織化学により十二指腸組織中の白血球介白質(IL)-1β、IL-6、腫瘍壊死因子-α(TNF-α)陽性発現を測定し、免疫蛍光法でタイトジャンクションタンパク質(Occludin)、閉鎖帯タンパク質-1(ZO-1)陽性発現を検出した。リアルタイム蛍光定量PCR法でYAP、TAZ、Bリンパ腫-2(Bcl-2)、Bcl-2関連Xタンパク質(Bax)mRNA発現レベルを検出し、TUNEL染色で十二指腸組織細胞のアポトーシス率を測定した。結果:対照群と比較し、モデル群ラットは著しい萎靡状態、細目、うずくまり、被毛は乱れ、便は軟便を示した。体重、3時間摂食量、胃排出率、小腸推進率は減少した(P<0.05、P<0.01)。十二指腸組織の固有層に多量の炎症浸潤が認められ、血清MTL、GAS含量は著明に低下した(P<0.01)。十二指腸組織中のp-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ蛋白発現比は増加し(P<0.01)、IL-1β、IL-6、TNF-α陽性発現は上昇した(P<0.01)。Occludin、ZO-1蛋白の平均蛍光強度は低下し(P<0.01)、Bax mRNA発現レベルは上昇し(P<0.01)、YAP、TAZ、Bcl-2 mRNA発現は低下した(P<0.01)。腸上皮細胞アポトーシス率は増加した(P<0.01)。介入後、モデル群と比較し電気鍼群ラットは精神状態が改善し、活動量が増加し、被毛は光沢を示し、便は正常化した。体重、3時間摂食量、胃排出率、小腸推進率は増加した(P<0.01)。十二指腸組織の固有層炎症浸潤は減少し、血清MTL、GAS含量は増加した(P<0.01)。十二指腸組織中のp-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ蛋白発現比は低下し(P<0.01、P<0.05)、IL-1β、IL-6、TNF-α陽性発現は減少した(P<0.05、P<0.01)。Occludin、ZO-1蛋白の平均蛍光強度は増加し(P<0.01、P<0.05)、Bax mRNA発現レベルは低下し(P<0.01)、YAP、TAZ、Bcl-2 mRNA発現レベルは増加した(P<0.01、P<0.05)。腸上皮細胞アポトーシス率は低下した(P<0.01)。結論:電気鍼刺激の「太衝」「足三里」はFD症状を有意に緩解し、十二指腸の軽度炎症反応を有効に抑制し、その機序はHippo/YAPシグナル経路の調節に関与すると考えられる。

关键词

電気鍼; 機能性消化不良; Hippo/YAP経路; 軽度炎症反応

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