目的は、電気鍼の「足三里」単独、「三陰交」単独、および組穴（「足三里」＋「三陰交」）の3種類の刺激方法が過敏性腸症候群（IBS）モデルマウスの行動学的および組織学的介入効果の差異、および異なる刺激方法における末梢・中枢神経系のニューロン応答の差異を比較し、穴位組合せ介入によるIBSの神経メカニズムの探究に実験的根拠を提供することである。方法は、雄性C57BL/6Jマウスに酵母ポリグルカンを直腸灌注しIBS動物モデルを構築し、無処置群、モデル群、足三里群、三陰交群および組穴群（モデル群は18匹、それ以外は各20匹）に無作為に割り付けた。7日間連続で電気鍼刺激（2 Hz/100 Hz、1 mA、1回15分、1日1回）を行い、von Frey繊維を用いて各群マウスの腹部機械的痛覚過敏（牽引痛）を検査し、ローターロッド試験で運動能力を評価し、AIを用いた3D非監督動物自発精密行動解析法により3D自発精密行動特性を評価した。HE染色で結腸組織構造と炎症レベルを観察し、Western blot法で結腸組織の炎症因子発現を検出し、単穴および組穴刺激がIBS症状を改善する効果差を評価した。マーカーウイルスでC57BL/6Jマウスの「足三里」および「三陰交」を支配する背根神経節（DRG）ニューロンの回路追跡を行い、Thy1-GCaMP6sマウスにおける電気鍼（1 mA、1分）刺激応答DRGニューロンを体内二光子カルシウムイメージングで記録し、活動依存性ニューロンマーキング技術を用いてトランスジェニックマウス（TRAP2；Ai14）の電気鍼（2 Hz/100 Hz、1 mA、15分）刺激による中枢神経ニューロン活性化を解析し、単穴および組穴刺激の末梢―中枢ニューロン応答差を探究した。結果は、対照群と比較して、モデル群は腹部機械的痛覚過敏の引っ込め反応回数および曲線下面積が増加（P<0.001、P<0.05）、運動能力（落下潜時および落下時のローターロッド速度）が低下（P<0.01）、結腸組織損傷と炎症反応が悪化（P<0.001）、インターロイキン1β（IL-1β）および腫瘍壊死因子α（TNF-α）の発現量が増加（P<0.001）、自発行動様式の変化（P<0.001、P<0.01、P<0.05）が見られた。3種類の電気鍼刺激方法はいずれもIBSモデルマウスの腹壁機械的痛覚過敏反応を有意に緩和し（P<0.001、P<0.05、P<0.01）、組穴刺激の有効介入範囲は単穴より広かった。組穴刺激は単穴と比較してIBSによる結腸組織損傷の回復、TNF-α発現レベルの低下（P<0.05）、および自発的弓背動作の単回持続時間の短縮と異なる自発行動動作の変換様式の改善（P<0.01、P<0.05）をより有効に行った。DRGニューロンの3刺激方式に対する応答は高度に異質で、記録されたニューロン活動の特徴に基づき3大類7小類に分類された。さらに、組穴刺激は単穴より多くのDRGニューロンを活性化し（P<0.05）、ニューロンのカルシウム信号強度も単穴刺激より高かった（P<0.05）。最後に、異なる脳領域のニューロンにおける3刺激方式の応答数に有意差があり、「足三里」と「三陰交」2つの単穴刺激と組穴刺激で活性化されたニューロンは視床下部室傍核（PVN）で最大限に重なり、島皮質（IC）での重なりは最小であり、ICニューロンの活性化には組穴の協調効果が必要であることを示唆した。結論：「足三里」＋「三陰交」の組穴刺激は単穴よりもIBSモデルマウスの腹部機械的痛覚過敏、結腸組織構造損傷および炎症状態、内臓痛に伴う自発行動変化の改善に優れ、その利点は末梢及び中枢ニューロンにおける異なる刺激方法の電気鍼信号の協調的統合に由来する可能性がある。

穴位組合せ;電気鍼;過敏性腸症候群;足三里;三陰交