본 연구는 “온양통맥” 뜸법이 동맥경화증(AS) 쥐의 인지질 3-키나제(PI3K)/단백질 키나제 B(Akt)/포유류 라파마이신 표적 단백질(mTOR) 신호경로 및 내피 기능 관련 인자에 미치는 영향을 연구하고, PI3K/Akt/mTOR 신호경로를 억제하여 AS를 예방 및 치료하는 “온양통맥” 뜸법의 가능한 기전을 탐색하였다. 방법으로 30마리의 수컷 ApoE^-/- 쥐를 무작위로 모델군, 뜸법군, 뜸법+작동제군으로 나누었고 각 군에 10마리씩 고지방 사료를 12주간 투여하여 AS 모델을 복제하였다. 10마리의 C57BL/6J 수컷 쥐를 대조군으로 하여 일반 사료를 12주간 급여하였다. 각 군은 모델링 첫날부터 중재를 시작하였으며, 대조군과 모델군은 단순히 잡아 고정하였고, 뜸법군은 “단중”, “신궐” 및 양측 “내관”, “혈해” 부위에 매회 30분간 뜸법 중재를 실시하였다. 뜸법+작동제군은 뜸 시행 30분 전에 복강 내 740Y-P(5 μmol·kg^-1·d^-1)를 주사하였다. 위 각 군은 매주 5일 중재를 12주간 연속 실시하였다. 쥐의 일반 상태 및 체중을 관찰하였고, 생화학적 분석을 통해 혈청 중 중성지방(TG), 총콜레스테롤(TC), 저밀도 지단백 콜레스테롤(LDL-C), 고밀도 지단백 콜레스테롤(HDL-C) 함량을 측정하였다. HE 염색법으로 쥐의 흉부 대동맥 병리형태를 관찰하였으며, ELISA법으로 혈청 내 산화질소(NO) 및 내피세포인자-1(ET-1) 함량을 측정하였다. 유세포분석법으로 대동맥 활성산소(ROS) 함량을 검출하였고, qPCR 및 서양 블롯법으로 대동맥 조직 내 PI3K, Akt, mTOR, 내피형 산화질소합성효소(eNOS) mRNA 및 단백질 발현을 조사하였다. 결과 대조군과 비교하여 모델군 쥐는 8주 및 12주 체중, 혈청 TC, TG, LDL-C 함량이 유의하게 증가(P<0.05, P<0.01)하였고, 혈청 HDL-C 및 NO 함량은 유의하게 감소(P<0.01)하였다. 대동맥궁 내벽은 불규칙하고 내막이 비후되었으며 “판막” 증식을 보였다. 혈청 ET-1 함량, 대동맥 내 ROS 함량, mTOR mRNA 발현, p-PI3K/PI3K 및 p-mTOR/mTOR 단백질 발현 비율이 유의하게 증가(P<0.01)하였고, 대동맥 내 eNOS mRNA 발현, eNOS 단백질 발현량 및 p-Akt/Akt 비율은 유의하게 감소하였다(P<0.01, P<0.05). 모델군과 비교하여 뜸법군 쥐는 대동맥궁에 내막세포 탈락이 가끔 관찰되었으나 명확한 병리학적 변화는 없었고, HDL-C를 제외한 다른 지표는 모두 역전되었다(P<0.01, P<0.05). 뜸법군과 비교할 때 뜸법+작동제군은 혈청 TC, TG, LDL-C 함량이 유의하게 증가(P<0.01, P<0.05)하였고, 대동맥궁에 소량 또는 극소량의 “판막” 증식과 내막에 가끔 내피세포 탈락이 나타났다. 혈청 NO 함량이 감소(P<0.05)하였고, 혈청 ET-1, 대동맥 내 ROS 함량, 대동맥 내 p-PI3K/PI3K 및 p-mTOR/mTOR 단백질 발현 비율은 유의하게 증가(P<0.01, P<0.05)하였으며, 대동맥 내 eNOS mRNA 발현, eNOS 단백질 발현량 및 p-Akt/Akt 비율은 유의하게 감소하였다(P<0.01, P<0.05). 결론 “온양통맥” 뜸법은 ApoE^-/- AS 쥐의 체중을 감소시키고 지질 이상을 개선하며, 대동맥 내피 손상을 수복하고 AS 증상을 완화시키며, 그 기전은 대동맥 PI3K/Akt/mTOR 신호경로를 조절하여 산화 스트레스 반응에 영향을 미쳐 내피 기능을 보호하는 것과 관련이 있을 수 있다.

“온양통맥” 뜸법; 동맥경화증; 인지질 3-키나제/단백질 키나제 B/포유류 라파마이신 표적 신호경로; 활성산소; 내피 기능; 산화 스트레스