전침 "족삼리"에 의한 당뇨병 전단계 혈당 항상성 회복 효과 기전 연구

LI Ya-jing ,  

ZHU Rong-jin ,  

SU Yang-shuai ,  

LI Tong ,  

LIU Xiao-yu ,  

WANG Li-li ,  

JING Xiang-hong ,  

摘要

목적은 전침 "족삼리"가 급성 고혈당, 낮은 위험 및 높은 위험 당뇨병 전단계 쥐의 혈당 조절 효과를 관찰하고, 낮은 위험 당뇨병 전단계의 췌도 β세포 기능에 대한 전침 조절 기전을 예비적으로 탐구하는 것이다. 방법: 본 연구는 급성 고혈당, 낮은 위험 당뇨병 전단계, 높은 위험 당뇨병 전단계 3부분 실험으로 나누어 수행되었으며, 각 실험에서 C57BL/6J 생쥐를 정상군, 모델군, 전침군으로 무작위 분류하였다. 급성 고혈당 및 고위험 당뇨병 전단계 실험에서는 각 군당 6마리, 저위험 당뇨병 전단계 실험에서는 각 군당 18마리를 사용하였다. 급성 고혈당 실험에서 복강 내 주사로 2 g/kg 포도당 용액을 투여하여 모델을 제작하였으며, 전침군 쥐에 대해 양측 "족삼리"에 1회 20분 간 전침 중재를 실시하였다. 저위험 당뇨병 전단계 실험에서는 고지방 사료를 1주간 급여하여 모델을 제작하였으며, 4일째부터 당뇨병 전단계 혈당 손상 기준에 도달한 시점부터 전침군 쥐에 대해 상기와 동일한 파라미터로 하루 1회 총 4회 전침 중재를 시행하였다. 고위험 당뇨병 전단계 실험에서는 고지방 사료를 8주간 급여하여 모델을 제작하였으며, 모델링 4주 후 전침군 쥐에 대해 같은 파라미터로 주 3회 총 12회 전침 중재를 수행하였다. 혈당 측정기를 사용하여 쥐의 혈당 및 포도당 내성을 측정하였고, ELISA법으로 혈청 당화혈색소, 인슐린, 글루카곤 농도를 측정하였다. HE 염색법을 통해 췌장 형태 변화를 관찰하였고, 췌도 β세포를 분리하여 PCR법으로 β세포 표지자 발현을 검출하였다. Western blot법으로 내질망 스트레스(ATF6, ERN1, EIF2AK3), 세포 노화(P21), 아세틸콜린 수용체(M2-AchR, M3-AchR) 단백질 발현 수준을 검출하였다. 면역형광염색법으로 췌장 조직 내 β세포 노화 표지자 P21, 췌내 신경절 및 미주신경 배핵(DMV)에서 췌장을 지배하는 아세틸콜린 전달효소(ChAT+) 신경세포 중 c-fos 양성 발현을 검사하였다. 결과: 급성 고혈당 실험에서 정상군과 비교하여 모델군 쥐의 혈당이 상승하였고(P<0.001), 혈청 인슐린 함량이 증가하였다(P<0.05). 모델군과 비교하여 전침군 쥐는 30분 및 60분 혈당이 감소하였고(P<0.01), 혈청 인슐린 함량이 증가하였다(P<0.05). 저위험 당뇨병 전단계 실험에서 정상군과 비교하여 모델군 쥐는 모델링 3일째 혈당이 상승하였고(P<0.001), 포도당 내성이 증가하였으며(P<0.05, P<0.01), β세포 내 M2-AchR 및 M3-AchR 아세틸콜린 수용체 단백질 발현 수준이 감소하였고(P<0.05), ATF6, ERN1, EIF2AK3 단백질 발현 수준은 증가하였으며(P<0.01, P<0.05), P21 단백질 발현 수준도 증가하였고(P<0.05), Insulin+/P21+ 공표지자 세포 수가 증가하였다(P<0.01). 모델군과 비교하여 전침군 쥐는 4, 6, 7일 혈당이 감소하였고(P<0.001, P<0.01), 포도당 내성이 감소하였으며(P<0.05, P<0.01), 혈청 인슐린 함량이 증가하였고(P<0.05), 췌내 신경절 및 DMV의 췌장 지배 ChAT+/c-fos+ 공표지자 신경세포가 증가하였으며(P<0.05), β세포 내 M2-AchR 및 M3-AchR 아세틸콜린 수용체 단백질 발현 수준이 증가하였고(P<0.01, P<0.05), ATF6, ERN1, EIF2AK3 단백질 발현 수준은 감소하였으며(P<0.01, P<0.05), P21 단백질 발현 수준이 감소하였고(P<0.05), Insulin+/P21+ 공표지자 세포 수가 감소하였다(P<0.01). 고위험 당뇨병 전단계 실험에서 정상군과 비교하여 모델군 쥐는 모델링 1주째 혈당이 상승하였고(P<0.001), 포도당 내성이 증가하였으며(P<0.05, P<0.01), 혈청 당화혈색소가 증가하였고(P<0.05), 췌도 부피가 증가하였으며 혈청 인슐린 함량이 증가하였고(P<0.01), 혈청 글루카곤 함량은 감소하였다(P<0.05). 모델군과 비교하여 전침군 쥐는 5주째 및 6주째 혈당이 감소하였고(P<0.01, P<0.05), 췌도 부피가 다소 감소하였으며 혈청 인슐린과 글루카곤이 모두 감소하였다(P<0.01, P<0.05). 결론: 전침 "족삼리"는 혈당 항상성을 회복시킬 수 있으며, 최적 효과 시기는 낮은 위험 당뇨병 전단계 단계이며, 그 기전은 미주신경 활성화에 의한 췌도 β세포 내 내질망 스트레스 억제와 연관될 수 있다.

关键词

전침; 족삼리; 당뇨병 전단계; 미주신경; 내질망 스트레스

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