전침이 폐경기 우울 모델 마우스 내측 전전두엽 피질 Glu/GABA 균형 매개 시냅스 가소성 개선

HUANG Chu-yao ,  

ZHANG Zhi-si ,  

CHEN Shu-min ,  

MAO Yue-ying ,  

ZHANG Ke-xing ,  

LIU Wen-hao ,  

HUANG Jian-peng ,  

LIU Jian-hua ,  

FU Wen-bin ,  

WANG Cong ,  

摘要

목적은 전침이 폐경기 우울 모델 쥐의 우울 행동 및 성호르몬 수치에 미치는 영향을 관찰하고, 전침이 내측 전전두엽 피질(mPFC)에서 글루타메이트(Glu)/γ-아미노부티르산(GABA) 균형 조절과 mPFC 시냅스 구조 및 기능 가소성에 미치는 영향을 탐구하는 것이다. 방법: 암컷 C57BL/6J 마우스를 무작위로 대조군, 모델군, 에스트라디올(E2)군 및 전침군으로 나누어 각 그룹에 14마리씩 배정하였다. 비닐시클로헥센 산화물과 만성 예측불가능한 스트레스를 이용해 폐경기 우울 모델을 구축하였다. 전침군은 '신수', '삼음교', '백회', '인당'에 각각 30분씩 전기침을 시행하였다. E2 군은 E2(10 μg·kg-1·일-1)을 하루 1회 피하 주사하였으며, 두 군 모두 28일간 실시하였다. 행동 평가는 개방장 실험(OFT), 강제 수영 실험(FST), 당수선호 실험으로 진행하였다. 혈청 성호르몬 수치는 ELISA로 측정하였다. 골지 염색으로 mPFC의 피라미드 신경세포 가지 수와 길이를 관찰하고 형태 변화를 평가하였다. Western blot 및 뇌 절편 전 세포막 전기 패치 클램프 전기생리학 기법으로 mPFC 소포형 글루타메이트 수송체 1(VGLUT1) 단백질 발현 및 피라미드 뉴런에서 미세 흥분성 시냅스 후 전류(mEPSC) 빈도를 측정하여 시냅스 전 Glu 수준을 평가하였다. 시냅스 후 밀도 단백질 95(PSD95), N-메틸-D-아스파르트산 수용체 아형 2B(NMDAR2B), NMDAR2A, Glu의 α-아미노-3-하이드록시-5-메틸-4-이서옥사졸프로피온산 수용체(AMPAR) 단백질 발현 및 mEPSC 진폭으로 시냅스 후 Glu 활성을 평가하였다. 시냅스 전 글루타메이트 탈탄산효소(GAD-65/67), GABA 소포 수송체(VGAT) 단백질 발현 및 mPFC 피라미드 뉴런 미세 억제성 시냅스 후 전류(mIPSC) 빈도를 측정하여 시냅스 전 GABA 수준을 평가하였다. 시냅스 후 GABA A 수용체 아형 γ-2(GABAARγ2)와 GABA 시냅스 후 앵커 단백질 Gephyrin 단백질 발현 및 mIPSC 진폭으로 시냅스 후 GABA 활성을 평가하였으며, Glu/GABA 균형도 평가하였다. 결과 대조군과 비교하여 모델군 마우스는 OFT 중심 구역 탐색 시간과 이동 거리가 감소하였고(P<0.001), FST 정지 시간이 증가하였으며(P<0.05), 당수 선호율이 감소하였다(P<0.001). 모델군과 비교하여 E2군과 전침군의 OFT 중심 구역 탐색 거리와 시간이 증가하였고(P<0.001, P<0.05), FST 정지 시간이 단축되었으며(P<0.01, P<0.05), 당수 선호율이 증가하였다(P<0.001). 대조군과 비교하여 모델군의 혈청 E2, 프로게스테론(PROG) 함량이 감소하였으며(P<0.01), 난포자극호르몬(FSH) 함량이 증가하였다(P<0.01). 모델군과 비교하여 E2군에서 혈청 E2, PROG 함량이 증가하였고(P<0.01), FSH 함량이 감소하였으며(P<0.01), 전침군은 통계학적으로 유의한 차이가 없었다. 대조군과 비교하여 모델군에서는 mPFC 피라미드 신경세포 가지 수와 총 길이, 동심원 반경과 교차점 수가 감소하였다(P<0.001, P<0.05). 모델군과 비교하여 E2군과 전침군에서는 가지 수와 총 길이, 동심원 반경과 교차점 수가 증가하였다(P<0.001, P<0.01, P<0.05). 대조군과 비교하여 모델군에서는 mPFC의 PSD95, NMDAR2A, GABAARγ2 단백질 발현이 증가하였으며(P<0.05), VGLUT1, NMDAR2B, GAD-65/67, Gephyrin, VGAT 단백질 발현은 감소하였다(P<0.05, P<0.01). 모델군과 비교하여 전침군과 E2군에서는 PSD95, GABAARγ2, NMDAR2A 발현이 감소하였고(P<0.05, P<0.001), VGLUT1, GAD-65/67, Gephyrin, VGAT 발현은 증가하였다(P<0.05, P<0.01). 전침군에서는 NMDAR2B 단백질 발현이 증가하였다(P<0.01). 대조군과 비교하여 모델군에서는 mEPSC 진폭과 mEPSC/mIPSC 빈도 비율이 증가하였으며(P<0.01), mIPSC 빈도는 감소하였다(P<0.001). 모델군과 비교하여 전침군과 E2군의 mEPSC 진폭과 mEPSC/mIPSC 빈도 비율이 감소하였고(P<0.01, P<0.05), mIPSC 빈도가 증가하였다(P<0.001, P<0.01). 결론 전침은 mPFC 피라미드 뉴런의 형태 및 연결성을 개선하며 Glu/GABA 균형 조절을 통해 매개되는 시냅스 구조 및 기능 가소성을 향상시켜 폐경기 우울증에서 치료 효과를 나타낸다.

关键词

폐경기 우울; 전침; 글루타메이트/γ-아미노부티르산 균형; 시냅스 가소성

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