인테그린/YAP/JNK 경로 기반 약재 부착 뜸과 아토르바스타틴 병용 치료 ApoE⁻/⁻ 동맥경화 생쥐의 작용 기전 탐구

LI Hong-ying ,  

LUO Hong-yan ,  

ZHU Min ,  

XUE Kai-yang ,  

LU Xiao-xiao ,  

CUI Jin ,  

摘要

본 연구의 목적은 약재 부착 뜸(隔药饼灸)과 아토르바스타틴의 병용이 ApoE⁻/⁻ 동맥경화증(AS) 생쥐의 혈지대사, 대동맥 병리구조, 플라크 침착 및 인테그린(integrin)/Yes 관련 단백질(YAP)/c-Jun N말단 키나제(JNK) 신호경로에 미치는 영향을 관찰하고, AS 예방 및 치료 기전을 탐구하는 것이다. 방법으로는 수컷 C57BL/6J 생쥐를 대조군으로 설정하고, 수컷 ApoE⁻/⁻ 생쥐를 무작위로 모델군, 서양약군, 약재 부착 뜸군 및 병용 치료군으로 나누어 각 군마다 9마리씩 배정했다. 고지방 사료로 AS 모델을 복제했다. 약재 부착 뜸군은 ‘단중’과 ‘신궐’에 1일 건너 1회, 주 3회 시술했으며; 서양약군은 아토르바스타틴 칼슘 3 mg·kg⁻¹·d⁻¹ 1일 1회 투여했다; 병용 치료군은 두 가지 방법을 병행했다. 모든 군은 8주간 지속적으로 중재했다. 치료 전후 생쥐 체중을 관찰하고, HE 염색으로 대동맥 병리 형태를 확인하며, Oil Red O 염색으로 대동맥 지질 플라크 면적을 측정했다. 생화학 분석기와 ELISA를 통해 혈청 중 중성지방(TG), 총콜레스테롤(TC), 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C), 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C), 혈관내피성장인자(VEGF), 내피소틴-1(ET-1), 인터루킨(IL)-6, IL-8, 종양괴사인자-α(TNF-α), 그리고 비색법으로 일산화질소(NO) 함량을 측정했다. Western blot법으로 대동맥 integrin αVβ3, YAP, 인산화(p)-YAP, p-JNK1/2, 세포간접착분자-1(ICAM-1), 혈관세포간접착분자-1(VCAM-1)의 단백질 발현 수준을 평가했다. 결과는 모델군이 대조군에 비해 체중 증가(P<0.01), 대동맥 내피 두께 증가, 거품세포와 지질 축적, 평활근 세포 증식과 부종, 탄력섬유 감소, 내피세포 간극 확대, 탄력막 파열, 동맥 지질 플라크 면적 증가(P<0.01), 혈청 TC, TG, LDL-C, IL-6, IL-8, TNF-α, ET-1, VEGF 상승(P<0.01), HDL-C와 NO 감소(P<0.01), integrin αVβ3, YAP, p-JNK1/2, ICAM-1, VCAM-1 단백질 발현 증가(P<0.01), p-YAP 단백질 발현 감소(P<0.01)를 보였다. 서양약군, 약재 부착 뜸군, 병용 치료군은 모델군에 비해 체중 감소(P<0.01), 체중 변화폭 저하(P<0.01), 대동맥 구조 규칙성 회복, 내피 두께 감소, 거품세포 및 지질 침착 감소, 평활근 세포 부종 및 염증 반응 완화, 그리고 기타 지표의 유의한 개선(P<0.01, P<0.05)을 나타냈다. 병용 치료군이 서양약군 및 약재 부착 뜸군에 비해 더 큰 체중 감소(P<0.05, P<0.01), 혈청 TC, TG, IL-6, IL-8, TNF-α 및 대동맥 integrin αVβ3, YAP 단백질 발현 감소(P<0.01, P<0.05), HDL-C 상승(P<0.01), p-YAP 발현 증가(P<0.01)를 보였다. 결론적으로 약재 부착 뜸과 아토르바스타틴 병용은 상승적 효과를 가지며, AS 생쥐의 혈지 수준을 조절하고 대동맥 내피 손상을 경감하며 염증 반응을 줄이는 데 관여하며, 이는 대동맥 integrin/YAP/JNK 신호경로 조절과 관련된 것으로 보인다.

关键词

약재 부착 뜸; 동맥경화; ApoE⁻/⁻ 생쥐; 인테그린 αVβ3; Yes 관련 단백질; c-Jun N말단 키나제

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