기능성 변비 마우스 결장 미토콘드리아 미접힘 단백질 반응 관련 단백질에 대한 전기침의 영향

Wang Wen ,  

Li Yanqiu ,  

Zeng Weijian ,  

Yan Xiangyun ,  

He Zhaoxuan ,  

Xiao Xianjun ,  

Li Ying ,  

Yao Junpeng ,  

摘要

목적은 기능성 변비(FC) 모델 마우스 대장에서 전기침 “톈슈” 및 “샹쥐쉬”가 미토콘드리아 미접힘 단백질 반응(UPRmt) 관련 단백질 발현에 미치는 영향을 관찰하고, 전기침이 FC 증상을 개선하는 잠재적 기전을 탐구하는 것이다. 방법: 18마리 수컷 C57BL/6J 마우스를 무작위로 대조군, 모델군, 전기침군으로 나누어 각 군에 6마리씩 배치하였다. 로페라미드 경구 투여로 14일간 FC 모델을 구축하였다. 전기침군에는 일측 “톈슈”와 “샹쥐쉬”에 교대하여 전기침(희밀파, 3 Hz/15 Hz) 치료를 주 5회, 총 10회 시행하였으며, 대조군과 모델군은 동일하게 고정만 하였다. 배변기능 평가는 최초 청색 변 배출 시간, 6시간 배변 입자 수, 변 특성 점수, 변 수분 함량 및 소장 추진율로 측정하였다. HE 염색으로 결장 조직의 병리 변화를 관찰하였고, 투과전자현미경으로 미토콘드리아 초미세구조를 관찰하였다. 세포유세포 분석법으로 미토콘드리아 막전위와 활성 산소(mtROS) 수준을 측정하였고, 비색법으로 미토콘드리아 ATP 함량을 측정하였다. 면역조직화학법으로 UPRmt 핵심 표지 분자인 열충격단백질60(HSP60)과 LON 단백분해효소1(LONP1)의 결장 조직 내 발현을 확인하였다. 결과: 대조군과 비교하여 모델군 마우스는 최초 청색 변 배출 시간이 연장되었고(P<0.01), 6시간 내 배변 입자 수가 감소하였으며(P<0.01), 변 특성 점수, 변 수분 함량 및 소장 추진율이 감소하였다(P<0.01, P<0.05). 결장 조직 미토콘드리아는 뚜렷한 부종과 막 손상, 심한 크리스타 절단을 보였고, 미토콘드리아 막전위가 저하되었으며(P<0.01), ATP 함량과 mtROS 수준이 각각 저하 및 상승하였다(P<0.01). 평활근세포(SMC)에서 HSP60과 LONP1 단백질 양성 발현이 감소하였다(P<0.01). 중재 후 전기침군은 모델군에 비해 최초 청색 변 배출 시간이 단축되고(P<0.01), 6시간 배변 입자 수가 증가하였으며(P<0.01), 변 특성 점수, 변 수분 함량 및 소장 추진율이 증가하였다(P<0.01, P<0.05). 결장 조직 미토콘드리아는 경미한 부종을 보였고, 막 및 크리스타 손상이 현저히 개선되었으며, 미토콘드리아 막전위가 상승하였고(P<0.01), ATP 수준이 상승하였으며(P<0.01), mtROS 수준이 감소하였다(P<0.01). SMC에서 HSP60과 LONP1 양성 발현이 증가하였다(P<0.05). 결론: 전기침 “톈슈”와 “샹쥐쉬”는 FC 마우스의 장관 운동 기능을 효과적으로 촉진하고, 결장 SMC 미토콘드리아 구조 및 기능을 회복시키며, 그 기전은 SMC에서 HSP60 및 LONP1 발현을 상향 조절하고, 이어서 UPRmt를 활성화하는 것과 관련이 있을 것으로 보인다.

关键词

전기침; 기능성 변비; 미토콘드리아; 미접힘 단백질 반응; 열충격단백질60; LON 단백분해효소1

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