摘要
목적은 비만 쥐의 간 자가포식에 미치는 전침이 AMP 활성화 단백질 키나제(AMPK)/포유류 라파마이신 표적 단백질(mTOR)/unc-51 유사 자가포식 활성화 키나제1(ULK1) 신호 경로를 조절하는 영향을 탐구하는 것이다. 방법: C57BL/6J 쥐를 정상군, 모델군, 전침군으로 무작위 배정했으며, 각 그룹은 8마리씩 구성되었다. 고지방 사료를 사용하여 비만 모델을 구축하였다. 전침군은 양측 ‘족삼리’와 ‘천추’ 전침 자극을 1회 30분, 주 5회, 4주간 진행하였다. 치료 전후 각 군 쥐의 Lee 지수 및 체중 변화를 관찰하였다; 공복 혈당을 측정하였고; 인슐린 내성 검사를 실시하여 면적하 곡선(AUC) 값을 계산하였다; ELISA법으로 공복 인슐린 및 혈청 저밀도 지단백 콜레스테롤(LDL-C), 고밀도 지단백 콜레스테롤(HDL-C), 총 콜레스테롤(TC), 중성지방(TG) 함량을 측정하고 인슐린 저항 지수를 산출하였다; 장간막 백색 지방 조직과 간 조직의 무게를 측정하였다; HE 염색법으로 각 군 쥐의 장간막 백색 지방 조직 및 간 조직의 형태학적 변화를 관찰하였다; 오일레드 O 염색법으로 간 조직의 지질 침착 변화를 관찰하였다; 투과 전자현미경으로 간 조직의 초미세구조를 관찰하였다; 웨스턴 블롯법으로 p-AMPK/AMPK, p-mTOR/mTOR, ULK1, 미세관 관련 단백질1 경쇄3-Ⅱ형(LC3-Ⅱ), 자가포식 관련 유전자5(Atg5), 자가포식 관련 유전자7(Atg7), 선택적 자가포식 연결 단백질(SQSTM1/p62) 단백질 발현을 측정하였다; 실시간 형광 정량 PCR법으로 각 군 쥐 간 조직에서 AMPK, mTOR, ULK1, LC3-Ⅱ, Atg5, Atg7, p62 mRNA 발현을 측정하였다. 결과: 정상군과 비교하여 모델군 쥐의 Lee 지수, 체중, 공복 혈당, 공복 인슐린, 인슐린 저항 지수 및 인슐린 내성 검사 AUC 값이 유의하게 증가하였다(P<0.01), 혈청 TG, TC, LDL-C 함량이 증가하였다(P<0.01), 혈청 HDL-C 함량은 감소하였다(P<0.01), 복부 백색 지방 조직과 간 조직의 무게가 증가하였다(P<0.01); 장간막 백색 지방 조직 내 지방 세포 직경이 현저히 커지고, 단위 면적 내 세포 수가 감소하였다; 간세포가 확장되고 배열이 흐트러지며, 다량의 지방 방울 공포가 나타났다; 다량의 주황색 지질 침착이 관찰되었다; 미토콘드리아가 위축되고 자가포식 소포가 감소하였다; 간 조직의 AMPK mRNA 및 p-AMPK/AMPK 단백질 발현이 감소하였다(P<0.01), mTOR mRNA 및 p-mTOR/mTOR 단백질 발현이 증가하였다(P<0.01), ULK1, LC3-Ⅱ, Atg5 및 Atg7의 mRNA와 단백질 발현이 감소하였다(P<0.01), p62 mRNA 및 단백질 발현은 증가하였다(P<0.01). 모델군과 비교하여 전침군 쥐의 Lee 지수, 체중, 공복 혈당, 공복 인슐린, 인슐린 저항 지수 및 인슐린 내성 검사 AUC 값이 유의하게 감소하였다(P<0.01), 혈청 TG, TC, LDL-C 함량이 감소하였다(P<0.01), 혈청 HDL-C 함량이 증가하였다(P<0.01), 복부 백색 지방 조직과 간 조직의 무게가 감소하였다(P<0.01, P<0.05); 장간막 백색 지방 조직 내 지방 세포 직경이 감소하고 단위 면적 내 세포 수가 증가하였다; 간세포 내에 명확한 지방 방울 공포가 관찰되지 않았다; 주황색 지질 침착이 감소하였다; 미토콘드리아 구조는 정상이며, 자가포식 소포가 증가하고 일부 자가포식체 및 자가포식 리소좀을 관찰하였다; 간 조직의 AMPK mRNA 및 p-AMPK/AMPK 단백질 발현이 증가하였다(P<0.01), mTOR mRNA 및 p-mTOR/mTOR 단백질 발현이 감소하였다(P<0.01), ULK1, LC3-Ⅱ, Atg5 및 Atg7의 mRNA와 단백질 발현이 증가하였다(P<0.01), p62 mRNA 및 단백질 발현이 감소하였다(P<0.01). 결론: 전침의 '족삼리'와 '천추'는 비만 쥐의 간 자가포식을 촉진할 수 있으며, 그 기전은 AMPK/mTOR/ULK1 신호 경로 조절과 관련이 있을 수 있다.
关键词
비만; 전침; AMPK/mTOR/ULK1 신호 경로; 자가포식
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