전기침 ‘족삼리’가 대장암 이식 종양 마우스 5-FU 화학요법 후 결장 점막 손상 및 NF-κB와 AQP8 단백질에 미치는 영향 완화

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

목적은 전기침 ‘족삼리’가 대장암 이식 종양 마우스의 5-플루오로우라실(5-FU) 화학요법 후 결장 점막 손상 및 핵인자 κB(NF-κB), 수로단백질 8(AQP8) 발현에 미치는 영향을 관찰하고 그 가능한 작용 기전을 탐색하는 것이다. 방법은 BALB/c 마우스에 대장암 세포주 CT26을 피하 주사하여 대장암 이식 종양 동물 모델을 구축하였다. 종양 크기가 100~300 mm3에 도달하면 성공적으로 모델링된 마우스를 무작위로 종양 보유군, 화학요법군, 화학요법+전기침군으로 나누어 각 6마리씩 배정하였다. 추가로 정상 BALB/c 마우스 6마리를 정상군으로 사용하였다. 화학요법군과 화학요법+전기침군은 분류 당일부터 5-FU 용액(50 mg/kg, 0.01 mL/g)을 복강 주사하였으며, 하루 1회, 총 5일간 시행하였다. 화학요법+전기침군은 화학요법 직후 매일 양측 '족삼리'에 연속파, 주파수 2 Hz, 강도 1~2 mA, 5분씩 5일간 전기침을 실시하였다. 실험 기간 동안 마우스 질병 활동 지수(DAI)를 매일 평가하였고, 종양 부피를 하루 1회 측정하였다. 채취 후 마우스 종양 질량과 결장 길이를 측정하였다. HE 염색법을 사용하여 결장 조직 형태를 관찰하였고, ELISA 법으로 혈청 내 디아민옥시다제(DAO)와 D-젖산(D-LA) 함량을 측정하였다. 면역조직화학법으로 결장 내 AQP8 양성 발현을 확인하였으며, 면역형광법으로 결장에서 NF-κB 핵 이전을 검출하였다. Western blot법으로 결장 내 NF-κB 및 AQP8 단백질 발현 수준을 측정하였다. 결과는 정상군과 비교 시 종양 보유군 마우스의 각 지표는 통계적 차이가 없었다(종양 부피 및 질량은 비교하지 않음). 종양 보유군과 비교해 화학요법군은 DAI 점수가 상승(P<0.05)하였고, 결장 길이, 종양 부피 및 질량은 감소(P<0.05), 혈청 DAO와 D-LA 함량은 증가(P<0.05), 결장 내 NF-κB 단백질 발현 및 핵 이전은 증가(P<0.05), 결장 조직 내 AQP8 단백질 발현 수준은 감소(P<0.05)하였다. 화학요법군과 비교해 화학요법+전기침군은 DAI 점수 및 혈청 DAO, D-LA 함량이 감소(P<0.05), 결장 내 NF-κB 단백질 발현 및 핵 이전이 감소(P<0.05), 결장 조직 AQP8 단백질 발현 수준이 증가(P<0.05)하였다. HE 염색 결과 정상군과 종양 보유군의 결장 조직 구조는 이상이 없었으나, 화학요법군 마우스는 결장 조직에서 선 구조 파괴, 염증 세포 침윤 등 병리적 손상이 관찰되었으며, 화학요법군과 비교해 화학요법+전기침군은 결장 융모 길이가 증가하고 조직 세포 배열이 개선되었으며 염증 세포 침윤이 감소하였다. 결론적으로 전기침 ‘족삼리’는 종양 보유 마우스의 5-FU 화학요법에 의한 NF-κB 신호 전달 경로의 과활성화를 억제하고 AQP8 단백질 발현을 상향 조절하며 장 점막 손상을 줄이고 DAO 및 D-LA 방출을 감소시켜 장 장벽 기능을 유지한다.

关键词

전기침; 이식성 대장직장암; 5-플루오로우라실; 장 점막 손상; 결장 조직; 핵인자 κB; 수로단백질 8

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