온침이 무릎 관절 연골세포 노화를 조절하여 골관절염 쥐 모델에 미치는 영향 연구

Feng Tianshi ,  

Li Junlei ,  

Jia Yejuan ,  

Tao Yuan ,  

Xu Jing ,  

摘要

목적은 온침이 골관절염(KOA) 모델 쥐의 무릎 관절 연골세포 노화에 미치는 영향을 탐구하고 온침과 온화구의 효과 차이를 비교하는 것이다. 방법: Wistar 쥐를 정상군, 모델군, 온화구군, 온침군으로 무작위 배정하였으며 각 군 당 12마리씩 배치하였다. KOA 모델은 아이오딘 아세트산 나트륨 주사법으로 복제하였다. 온화구군과 온침군의 쥐들에게 각각 '복토(Futu)'와 '족삼리(Zusanli)'에 온화구와 온침을 30분씩 1회, 격일로 4주간 중재하였다. Lequesne MG 행동 점수로 쥐들의 무릎 관절 기능을 평가하고, 각 군 쥐들의 오른쪽 무릎 관절 횡경 직경 및 오른쪽 족저 통각 역치를 측정하였다; HE 및 Safranin O 고화염색을 이용해 무릎 관절의 병리 형태 변화를 관찰하고 Mankin’s, OARSI 점수를 평가하였다; ELISA법으로 혈청 내 인터루킨(IL)-6, IL-18, 기질 금속단백분해효소(MMP)-13 함량을 검사하였다; 면역조직화학법으로 무릎 연골 조직 내 세포주기 의존성 키나제 억제제 4(P16INK4A), 세포주기 의존성 키나제 억제제 1A(P21Waf1/Cip1), IL-6, MMP-13 및 Ⅱ형 콜라겐(Collagen-Ⅱ)의 양성 발현을 검출하였다; Western blot법으로 연골 조직 내 P16INK4A, P21Waf1/Cip1, Collagen-Ⅱ, IL-6, MMP-13 단백질의 상대적 발현 수준을 측정하였다. 결과: 정상군과 비교했을 때 모델군은 Lequesne MG 점수가 상승(P<0.01), 오른쪽 무릎 관절 횡경 직경이 증가(P<0.01), 통각 역치가 감소(P<0.01)하였다; 모델군과 비교했을 때 온화구군과 온침군은 Lequesne MG 점수가 하락(P<0.01), 오른쪽 무릎 관절 횡경 직경이 감소(P<0.01), 통각 역치가 상승(P<0.01)하였다; 온화구군과 비교했을 때 온침군은 Lequesne MG 점수가 낮아지고(P<0.01), 통각 역치가 높아졌다(P<0.01). 모델군은 무릎 연골 퇴행성 변화를 나타내었으며 표층 연골 손상 및 조선선 소실이 관찰되었고, 온화구군과 온침군은 퇴행 정도가 경감되었으며 온침군에서 개선 효과가 더 뚜렷하였다. 정상군과 비교했을 때 모델군은 Mankin’s와 OARSI 점수가 상승했으며(P<0.01), 모델군과 비교했을 때 온화구군과 온침군은 두 점수가 하락(P<0.01)하였고 온침군 점수가 온화구군보다 낮았다(P<0.05). 정상군과 비교했을 때 모델군 혈청 내 IL-6, IL-18, MMP-13 함량이 상승(P<0.01)하였고 무릎 연골 조직 내 P16INK4A, P21Waf1/Cip1, IL-6, MMP-13 양성 발현과 단백질 발현이 상승(P<0.01)하였으며 Collagen-Ⅱ 양성 발현과 단백질 발현이 감소하였다(P<0.01); 모델군과 비교했을 때 온화구군과 온침군 혈청 IL-6, IL-18, MMP-13 함량이 하락(P<0.01)하였고 무릎 연골 조직 내 P16INK4A, P21Waf1/Cip1, IL-6, MMP-13 양성 발현과 단백질 발현이 하락(P<0.01, P<0.05)하였으며 Collagen-Ⅱ 양성 발현과 단백질 발현이 상승하였다(P<0.01); 온화구군과 비교했을 때 온침군은 위 지표(무릎 관절 횡경 직경 제외)의 변화가 더 뚜렷하였다(P<0.01, P<0.05). 결론 온침은 쥐의 KOA를 효과적으로 개선할 수 있으며 온화구보다 효과가 우수하고, 그 기전은 연골세포 노화 억제와 관련이 있을 수 있다.

关键词

무릎 골관절염;관절 연골;세포 노화;온침;온화구

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