전침이 Piezo1 단백질을 통해 NO/cGMP/PKG 신호 경로를 조절하여 신경근형 경추병증 쥐의 통증을 개선하는 기전 연구

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

본 연구의 목적은 전침이 신경근형 경추병증(CSR) 쥐의 Piezo1 단백질 조절 작용 및 일산화질소(NO)/환상구아노신일인산(cGMP)/단백질 키나제 G(PKG) 신호 경로에 미치는 영향을 탐구하고, 전침 치료가 CSR의 진통 기전을 조사하는 것이다. 방법: 수컷 SD 쥐를 가짜 수술군, 모델군, 전침군, 전침+Yoda1군으로 무작위 배정하였고 각 군에 10마리씩 배치하였다. 모델군, 전침군, 전침+Yoda1군에서는 척추관 삽선법으로 CSR 모델을 제작하였다. 전침군은 양측 "합곡"과 "태충"혈에 전침 치료를 1회 20분씩, 매일 1회, 연속 7일간 시행하였다; 전침+Yoda1군은 Piezo1 작용제 Yoda1(1.5 mg/kg)을 복강주사한 후 전침 치료를 하였다. 전침 중재 전후로 쥐의 보행 점수, 기계적 족축 역치 및 열 족축 반응 잠복기 측정을 실시하였고, HE 염색으로 병변 부위 척수 조직의 병리 변화를 관찰하였다; qPCR법으로 척수 조직의 Piezo1 유전자 발현 수준을 측정하였다; 면역형광 이중 염색법으로 척수 조직에서 Piezo1과 칼모듈린(CaM) 발현을 확인하였다; 웨스턴 블롯법으로 척수 조직 내 CaM, 신경원형 일산화질소 합성효소(nNOS), 용해성 구아닐산 사이클레이스(sGC), PKG1 단백질 발현을 측정하였다; ELISA법으로 척수 조직 내 cGMP 함량을 확인하였으며, 아질산염 발색법으로 척수 조직 NO 함량을 측정하였다. 결과: 가짜 수술군과 비교하여 모델군 쥐는 중재 전 보행 점수가 상승하였고(P<0.01), 기계적 족축 역치는 감소하며 열 족축 잠복기는 단축되었다(P<0.01); 모델군 쥐의 척수 조직에서는 Piezo1 mRNA, Piezo1 및 CaM 면역형광 강도 및 공위치 정도, CaM, nNOS, sGC, PKG1 단백질 상대 발현, cGMP 및 NO 함량이 모두 유의하게 증가하였다(P<0.01); HE 염색에서 모델군 척수 조직은 신경원 위축, 세포 염색 심화, 핵과 세포질 경계 불분명, 신경교 세포 증식, 세포 밀도 증가 및 미세혈관 확장 출혈을 관찰하였다. 모델군과 비교하여 전침군은 보행 점수가 감소하였고(P<0.01), 기계적 족축 역치는 상승하며 열 족축 잠복기는 연장되었다(P<0.01); 척수 조직의 Piezo1 mRNA 발현, Piezo1 및 CaM 면역형광 강도 및 공위치 정도, CaM, nNOS, sGC, PKG1 단백질 상대 발현, cGMP 및 NO 함량이 모두 감소하였다(P<0.01); HE 염색에서 전침군 척수 조직은 일부 신경원 위축이 관찰되었고, 미세혈관 확장 및 신경교 세포 증식이 모델군에 비해 감소하였다. 전침군과 비교하여 전침+Yoda1군은 열 족축 잠복기가 단축되었고(P<0.01); Piezo1 mRNA 발현, Piezo1 및 CaM 면역형광 강도 및 공위치 정도, CaM, nNOS, sGC, PKG1 단백질 상대 발현, cGMP 및 NO 함량이 모두 증가하였다(P<0.05, P<0.01); HE 염색에서 전침+Yoda1군 척수 조직은 신경원 위축, 신경교 세포 수 증가 및 일부 미세혈관 확장 출혈이 관찰되었다. 결론: 전침은 CSR 쥐의 통증을 효과적으로 완화할 수 있으며, 그 기전은 척수 Piezo1 단백질 활성화를 억제하고 NO/cGMP/PKG 신호 경로를 억제함으로써 진통 효과를 나타내는 것으로 보인다.

关键词

신경근형 경추병증;전침;진통;Piezo1 단백질

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