목적은 침술이 허혈성 뇌졸중 모델 쥐의 초시간창 혈전용해 안전성 효과를 향상시킬 수 있음을 명확히 한 기초 위에, 수용체 상호작용 단백질 키나제 1(RIPK1)/수용체 상호작용 단백질 키나제 3(RIPK3)/기질 혼합 계열 키나제 유사 단백질(MLKL) 신호 경로를 억제하여 매개하는 프로그램된 괴사에 의해 혈전용해 안전성을 향상시키는 기전을 밝히는 것이다. 방법은 무작위로 33마리 SD 쥐를 가성수술군으로 선정하고, 성공적으로 모델을 구축한 99마리 SD 쥐를 무작위 숫자표법에 따라 모델군, 6시간 혈전용해군, 침술+6시간 혈전용해군으로 나누었으며 각 군당 33마리씩 배치하였다. 가성수술군을 제외한 나머지 군 쥐는 모두 자가 혈전색전법으로 허혈성 뇌졸중 모델을 구축하였다. 6시간 혈전용해군은 모델 구축 성공 후 6시간에 재조합 조직형 플라스미노겐 활성제 정맥 혈전용해 치료를 시행하였으며, 침술+6시간 혈전용해군은 6시간 혈전용해와 동시에 양측 내관, 수구 혈자리로 침술을 시행하고 20분간 유침하였다. 베더슨 점수를 사용하여 쥐의 신경기능을 평가하였고, 2,3,5-트리페닐테트라졸륨염색법으로 뇌경색 부피를 관찰하였으며, 에반스블루 침투법으로 혈뇌장벽(BBB) 투과성을 검출하였고, 부피비중법으로 뇌 수분 함량을 측정하였으며, 분광광도법으로 허혈 부위 뇌조직의 헤모글로빈 농도를 측정하였고, 웨스턴 블랏법으로 허혈 반음영 부위의 RIPK1, RIPK3, 인산화(p)-MLKL 단백질 발현을 검출하였으며, 실시간 형광 정량 PCR법으로 RIPK1, RIPK3, MLKL mRNA 발현을 검출하였고, 이중 면역형광 염색법으로 p-MLKL과 내피세포 공위치 상태를 확인하였다. 결과는 모델 구축 후 쥐의 혈류량이 현저히 감소하였고, 모델 구축 성공 후 2시간에 쥐의 신경 행동학 점수가 상승하였다(P<0.01). 모델 구축 24시간 후 가성수술군과 비교하여 모델군은 신경 행동학 점수, 뇌경색 부피 백분율 및 BBB 투과성이 증가하였으며(P<0.01), 허혈 반음영 부위 RIPK1 단백질 발현 수준이 상승하였고(P<0.05), RIPK1, RIPK3, MLKL mRNA 발현 수준이 증가하였다(P<0.01, P<0.05); 허혈 반음영 부위 p-MLKL과 내피세포 공위치 양성 세포 백분율이 증가하였다(P<0.01). 모델군과 비교하여 6시간 혈전용해군은 BBB 투과성, 뇌 수분 함량 및 뇌 헤모글로빈 농도가 추가로 증가하였으며(P<0.01, P<0.05), 허혈 반음영 부위 RIPK3, p-MLKL 단백질 발현 수준이 상승하고(P<0.05), RIPK3, MLKL mRNA 발현 수준이 증가하였으며(P<0.05), 허혈 반음영 부위 p-MLKL과 내피세포 공위치 양성 세포 백분율이 증가하였다(P<0.01). 모델군과 비교하여 침술+6시간 혈전용해군은 신경 행동학 점수, 뇌경색 부피 백분율, BBB 투과성 및 뇌 수분 함량이 감소하였고(P<0.01, P<0.05), 허혈 반음영 부위 RIPK1 단백질 및 mRNA 발현 수준이 감소하였으며(P<0.05), 허혈 반음영 부위 p-MLKL과 내피세포 공위치 양성 세포 백분율이 감소하였다(P<0.05). 6시간 혈전용해군과 비교하여 침술+6시간 혈전용해군은 신경 행동학 점수, 경색 부피 백분율, BBB 투과성, 뇌 수분 함량 및 뇌 헤모글로빈 농도가 감소하였으며(P<0.01), 허혈 반음영 부위 RIPK1, RIPK3 및 p-MLKL 단백질 발현 수준이 감소하였고(P<0.05, P<0.01), RIPK1, RIPK3, MLKL mRNA 발현 수준이 감소하였으며(P<0.01, P<0.05), 허혈 반음영 부위 p-MLKL과 내피세포 공위치 양성 세포 백분율이 감소하였다(P<0.01). 결론은 침술의 적시 개입은 허혈성 뇌졸중 쥐의 혈전용해 후 신경 기능을 개선하고 뇌경색 부피를 줄이며 BBB 투과성을 낮추고 혈전용해 합병증 발생을 감소시켜 혈전용해 안전성을 향상시키며, 그 기전은 침술이 RIPK1/RIPK3/MLKL 신호 경로 매개 내피세포 프로그램 괴사를 억제하는 것과 관련이 있을 수 있다.

침술; 허혈성 뇌졸중; 프로그램 괴사; 혈전용해 안전성