침술이 MEK/ERK 경로를 통해 염증 반응과 세포 자멸사를 조절하여 조기 난소 기능 부전을 개선하다

Guo Lihong ,  

Wu Xiaohong ,  

Hao Jianheng ,  

Chang Boya ,  

Liu Liying ,  

摘要

목적은 침술이 조기 난소 기능 부전(POI) 쥐의 난소 기능을 개선하는 가능한 기전을 매개하는 염증 반응과 세포 자멸사를 매개하는 미토겐 활성 단백질 키나제( MEK)/세포외 신호 조절 키나제(ERK) 경로를 통한 조절을 탐구하는 것이다. 방법: SD 수컷 쥐를 무작위 숫자표법으로 백색 대조군, POI군, 침술군으로 나누었으며 각 군당 15마리씩 선정하였다. POI군과 침술군 쥐들에게는 POI 모델을 복제하기 위해 싸이클로포스파미드를 15일간 복강내 주사하였다. 침술군에서는 '관원'과 양측 ‘삼음교’에 하루 1회, 각 30분씩 3주간 침술을 시술하였다. 각 군 쥐의 발정주기를 관찰하였으며, 체중, 난소 습중을 측정하고 난소 지수를 계산하였다. HE염색을 통해 난소 병리 형태를 관찰하고 각 단계 난포를 계수하였다. ELISA법으로 혈청 항뮐러관 호르몬(AMH), 에스트라디올(E2), 난포자극호르몬(FSH), 인터류킨(IL)-1β, IL-10, 종양괴사인자 α(TNF-α) 및 난소 내 IL-1β, IL-10, TNF-α 함량을 측정하였다. 유세포분석법으로 난소 과립세포의 세포 자멸사 수준을 측정하였다. 실시간 형광 정량 PCR법으로 난소 MEK1/2, ERK1/2, Bcl-2 관련 X 단백질(Bax), B 세포 림프종-2 단백질(Bcl-2), 핵인자 κB p65(NF-κB p65), 사이클로옥시게나제-2(COX-2) mRNA 발현을 조사하였다. 웨스턴 블롯법으로 난소의 인산화(p)-MEK1/2, MEK1/2, p-ERK1/2, ERK1/2, Bax, Bcl-2, NF-κB p65, COX-2 단백질 발현을 분석하였다. 면역형광법으로 난소 내 p-ERK1/2 단백질 발현을 탐지하였다. 결과: 대조군과 비교했을 때, POI군에서는 발정주기 장애율이 증가하였으며(P<0.01), 체중, 난소 습중 및 난소 지수가 모두 감소하였다(P<0.01); 난소 조직 구조가 혼란스러워졌고, 원시, 1차, 2차, 성숙 난포 수가 감소하였다(P<0.01), 폐쇄 난포 수가 증가하였다(P<0.01); 혈청 FSH, IL-1β, TNF-α 및 난소 IL-1β, TNF-α 함량이 증가하였고(P<0.01), 혈청 AMH, E2, IL-10 및 난소 내 IL-10 함량이 감소하였다(P<0.01); 난소 과립세포 세포 자멸사 수준이 증가하였으며(P<0.01), MEK1/2, ERK1/2, Bax, NF-κB p65, COX-2 mRNA 발현이 증가하였고 Bcl-2 mRNA 발현은 감소하였다(P<0.01); 난소 p-MEK1/2 및 MEK1/2, p-ERK1/2 및 ERK1/2 단백질 발현 비율과 Bax, NF-κB p65, COX-2 단백질 발현이 증가하였고(P<0.01), Bcl-2 단백질 발현은 감소하였다(P<0.01); 난소 p-ERK1/2 형광 발현이 증가하였다(P<0.01). POI군과 비교했을 때 침술군에서는 상기 지표들이 역전되었다(P<0.01, P<0.05). 결론: 침술은 POI 쥐의 난소 기능을 개선할 수 있으며, 이는 MEK/ERK 신호 경로를 조절하여 난소 염증 반응을 완화하고 과립세포의 세포 자멸사를 억제하는 것과 관련이 있을 수 있다.

关键词

조기 난소 기능 부전;침술;MEK/ERK 신호 경로;염증 반응;세포 자멸사

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