NGF/TrkA 신호 경로에 기초한 전기침이 간위부 불균형형 비미란성 위식도 역류병 쥐의 중추 감작 개선 기전 탐구

TANG Ming-jie ,  

LI Ying-hong ,  

ZHU Tian-yi ,  

XIE Zhong-qi ,  

ZHENG Shi-yi ,  

XU hang ,  

XU Lin-ling ,  

XU Ping-ping ,  

ZHANG Cai-rong ,  

CHEN Chao-ming ,  

摘要

목적은 간위부 불균형형 비미란성 위식도 역류질환(NERD) 쥐에서 전기침이 중추 감작에 미치는 영향을 관찰하고 그 작용 기전을 탐구하는 것이다. 방법: 수컷 SD 쥐를 무작위로 공백군, 모델군, 전기침군, 서약군으로 나누어 각 군별 10마리로 수행하였다. 공백군을 제외한 나머지 3군은 기초 감작(복강내 난백항원 투여 + 수산화 알루미늄 보조제)과 꼬리 집기 자극을 병용해 간위부 불균형형 NERD 모델을 제작하였다. 전기침군은 "지양", "신도", "대추", "백회"에 전기침을 1회 30분, 1일 1회, 연속 2주간 시행하였다. 서약군은 오메프라졸(1.8 mg·kg-1)을 1일 1회 관강 투여하며 연속 2주간 처리하였다. 기초 감작 후 및 중재 종료 후 설탕물 선호도 검사를 시행하고 von Frey 통증 측정기를 사용해 쥐의 기계적 족축 반사역치(MWT)를 측정하였다. 중재 종료 후 복벽 철회 반사(AWR) 실험을 시행하고, 마지막으로 식도 산 관류 실험을 진행한 뒤 희생하여 조직을 채취하였다. 전자 현미경으로 쥐의 척수 시냅스 소포 수와 식도 점막 상피세포 간격을 관찰하였고, ELISA법으로 혈청 가스트린(GAS) 및 모틸린(MTL) 함량을 측정하였다. Western blot법으로 척수 신경 성장 인자(NGF), 티로신 키나아제 A(TrkA), 글루탐산 수용체 AMPA형 소단위 1(GluA1), 후시냅스 치밀 단백질 95(PSD95) 단백질 발현 수준을 측정하였다. 실시간 형광 정량 PCR법으로 척수 NGF, TrkA mRNA 발현 수준을 측정하였고, 면역형광법으로 척수 GluA1, PSD95 양성 발현 수준을 검출하였다. 결과: 공백군과 비교하여 모델군 쥐의 설탕물 선호율이 감소했고(P<0.01), MWT 감소(P<0.01), 40, 60, 80 mmHg 확장압에서 AWR 점수 상승(P<0.01), 내장 통증 역치 감소(P<0.01), 척수 시냅스 소포 수 증가, 식도 점막 상피세포 간격 확장, 혈청 GAS, MTL 함량 감소(P<0.01), 척수 조직 내 NGF, TrkA, GluA1, PSD95 단백질 발현 증가(P<0.01), NGF, TrkA mRNA 발현 증가(P<0.01), GluA1, PSD95 단백질 평균 형광 강도 증가(P<0.01)하였다. 모델군과 비교하여 전기침군과 서약군에서 설탕물 선호율, MWT, 내장 통증 역치, 혈청 MTL 함량이 증가하였고(P<0.01, P<0.05), 40 mmHg 압력에서 AWR 점수가 감소(P<0.01, P<0.05), 척수 조직 내 NGF, PSD95, TrkA 단백질 발현이 감소(P<0.01, P<0.05), TrkA mRNA 발현이 감소(P<0.01, P<0.05)하였다. 전기침군은 60, 80 mmHg 압력에서 AWR 점수가 감소(P<0.01), 혈청 GAS 함량이 증가(P<0.01), 척수 조직 내 NGF mRNA 발현이 감소(P<0.01), GluA1, PSD95 평균 형광 강도가 감소(P<0.01)하였다. 전기침군과 서약군 쥐의 척수 시냅스 소포 수가 현저히 감소하였으며 식도 점막 상피세포 간격도 회복되는 경향을 보였다. 전기침군과 비교하여 서약군의 내장 통증 역치 및 MWT가 감소(P<0.01)하였다. 결론: 전기침은 간위부 불균형형 NERD 쥐에서 내장 고감작 반응을 완화하고 중추 감작을 감소시키며, 그 기전은 NGF/TrkA 신호경로 억제와 관련이 있을 수 있다.

关键词

비미란성 위식도 역류병; 전기침; 내장 고감작; 중추 감작; 척수; NGF/TrkA 신호 경로

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