전침 병용 항생제에 의한 미주신경 배핵 타겟 활성화가 미주신경-부신축을 촉진하여 패혈증 생쥐 염증 반응 완화 및 사망률 감소 메커니즘

Liu Jiabao ,  

Ren Hongxia ,  

Lin Qishun ,  

Zhao Shuai ,  

Li Tong ,  

Jian Hongwei ,  

Sun Hong ,  

Yu Lingling ,  

Jing Xianghong ,  

Li Man ,  

Zhang Hongxing ,  

摘要

목적은 전침과 항생제가 미주신경 배핵(DMV)을 통해 미주신경-부신축을 조절하여 카테콜아민 분비를 촉진하고 염증성 폭풍을 완화하며 패혈증 생쥐의 생존율을 높이는 메커니즘을 탐구하는 것이다. 방법: 실험 1: 50마리 C57BL/6 생쥐를 가짜수술군, 모델군, 항생제군, 전침군, 항생제+전침군으로 10마리씩 5그룹으로 나누었다. 맹장 결찰 천공술(CL P)로 패혈증 모델을 구축하였다. 전침군은 양측 '족삼리'에 전침(10 Hz, 0.5 mA) 15분, 하루 1회, 3일 연속 실시하였다; 항생제군은 복강 내에 이미페넴 시라스타틴 나트륨(30 mg/kg)을 12시간마다 1회, 3일간 주사하였다; 항생제+전침군은 동일한 전침 및 항생제 중재를 받았다. 각 그룹의 3일 생존율과 체중 변화를 관찰하였고, ELISA로 혈청의 IL-6, TNF-α 농도를 측정하였다; HE 염색으로 맹장 조직 병리학 및 염증 세포 수를 관찰하였으며, 뇌 전체 투명화로 DMV 뇌 영역의 c-Fos 단백질 발현을 확인하였다. 실험 2: 50마리 Chat-Cre 생쥐를 가짜수술+빈 바이러스군, 모델+빈 바이러스군, 침약 결합+빈 바이러스군, 침약 결합+억제 바이러스군, 항생제+활성화 바이러스군으로 무작위 배정하였다. 모델링 3주 전 DMV에 대응 바이러스를 주입하였고, 3주후 CLP를 시행하였다. 수술 후 매일 클로자핀 N-옥사이드(CNO, 3 mg/kg)를 주사하고 항생제 또는 전침을 같은 방식으로 적용하였다. ELISA로 혈청 IL-6, TNF-α를 측정하고, HE 염색으로 맹장 염증 반응을 관찰하였으며, 초고성능 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법으로 혈청 도파민(DA), 아드레날린(E), 노르아드레날린(NE) 및 대사산물 3-메톡시 티라민(3-MT), 3-메톡시 노르아드레날린(NMN), 3-메톡시 아드레날린(MN) 수치를 측정하였다; 면역형광법으로 맹장 조직에서 FOXP3+/CD4+ 세포 수를 확인하였다. 결과 실험 1: 가짜수술군과 비교하여 모델군은 3일 생존율과 체중이 현저히 감소하였고(P<0.0001), 혈청 IL-6, TNF-α 농도는 상승하였으며(P<0.0001), 맹장의 염증 세포 침윤 수가 증가하였다(P<0.0001). 모델군과 비교하여 항생제+전침군은 생존율이 증가하고(P<0.05), 체중 감소가 완화되었으며(P<0.0001), 혈청 IL-6, TNF-α 농도가 감소하고(P<0.0001), 염증 세포 침윤이 줄어들었으며(P<0.0001), DMV 영역의 c-Fos 양성 세포 밀도가 증가하였다(P<0.0001). 이 지표들은 단독 전침군이나 항생제군보다 우수하였다. 실험 2: 가짜수술+빈 바이러스군과 비교하여 모델+빈 바이러스군은 혈청 염증 인자 농도와 맹장 염증 세포 수가 증가하였고(P<0.0001), 카테콜아민과 대사산물 수치 및 FOXP3+/CD4+ 세포 수가 감소하였다(P<0.0001); 모델+빈 바이러스군과 비교하여 침약 결합+빈 바이러스군, 침약 결합+억제 바이러스군, 항생제+활성화 바이러스군은 혈청 염증 인자와 맹장 염증 세포 수가 감소하였으며(P<0.0001, P<0.01, P<0.05), 카테콜아민과 대사산물 수치 및 FOXP3+/CD4+ 세포 수가 증가하였다(P<0.01, P<0.05, P<0.001, P<0.0001); 침약 결합+빈 바이러스군과 비교하여 침약 결합+억제 바이러스군은 이 지표들이 반전되었다(P<0.01, P<0.001, P<0.05, 3-MT 제외). 결론 족삼리에 대한 전침과 항생제 병용 치료가 CLP 생쥐에서 가장 우수한 치료 효과를 보였으며, 그 기전은 아마도 DMV 콜린성 신경원 활성화, 미주신경-부신축 조절을 통한 카테콜아민 분비 촉진, 염증 반응 억제를 통한 생존율 향상일 것이다.

关键词

패혈증; 전침; 족삼리; 미주신경-부신축; 염증 반응; 면역 조절

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