연수 앞쪽 복측 측면 영역 TH 양성 신경세포가 전기침을 통한 기능성 변비 쥐의 장 운동 장애 개선을 매개한다

Wang Dan ,  

He Zhaoxuan ,  

Yu Mingkai ,  

Wu Ruohan ,  

Deng Xiao ,  

Luo Yucai ,  

Li Yifan ,  

Lai Peng ,  

Yao Xiaoheng ,  

Yin Tao ,  

Zeng Fang ,  

摘要

목적은 연수 앞쪽 복측 측면 영역(RVLM)의 타이로신 하이드록실라제(TH) 양성 신경세포가 전기침 치료가 기능성 변비(FC) 쥐의 장 운동 장애를 개선하는 데 미치는 역할을 탐구하는 것이다. 방법: 먼저, 시냅스 가로지르는 바이러스를 이용해 근위 결장을 지배하는 뇌 영역을 확인하였다. 다음으로, 18마리 C57BL/6J 생쥐를 정상군, 모델군, 전기침군으로 무작위 배정하여 각 군당 6마리씩 나누었다. FC 모델은 로페리미드 염산염을 경구 투여하여 구축하였다. 전기침군에는 ‘천추’와 ‘상거허’ 혈자리에 전기침을 시행하였으며, 1회 치료 기간은 5일, 총 2회 치료하였다. 각 군의 배변 상태를 관찰하고 변의 수분 함량을 측정하였다; 첫 번째 흑변 배출 시간을 기록하였다; 소장의 추진률을 측정하였다; ELISA법으로 혈청과 결장에서 TH 함량을 측정하였다; 면역 형광법으로 RVLM 내 TH/c-Fos 공동 발현을 확인하였다. 이후, 12마리의 C57BL/6J 생쥐를 무작위로 공란 바이러스 + 클로자핀-N-옥사이드(CNO)군과 억제 바이러스 + CNO군으로 나누었고, 18마리의 C57BL/6J 생쥐를 무작위로 공란 바이러스 + CNO군, 전기침군, 활성화 바이러스 + CNO + 전기침군으로 나누어 각 군당 6마리씩 하였다. 각 군의 RVLM 뇌 영역에 해당 바이러스를 주입하였으며, 바이러스 발현 후 21일 차에 복강 내 CNO(1 mg/kg)를 주사하였다. 전기침군과 활성화 바이러스 + CNO + 전기침군은 CNO 주사 30분 후 전기침 간섭을 시행하였고, 방법은 상동하다. 위 각 군에 대해 배변 관찰 및 장 운동성 검사를 같은 방법으로 수행하였다. 마지막으로, 별도의 18마리 C57BL/6J 생쥐의 RVLM 뇌 영역에 rAAV-hSyn-GCaMP6s 바이러스를 주입하였으며, 바이러스 전환 21일 후 무작위로 공백군, 모델 대조군, 모델 + 전기침군으로 나누어 각 군당 6마리씩 하였다. 다중 채널 광섬유 기록 시스템을 이용하여 RVLM 뇌 영역 신경 세포 칼슘 신호 변화를 기록하였다. 결과: 역행성 시냅스 가로지르는 바이러스 추적 실험 결과 RVLM 신경 세포와 근위 결장 사이에 신경 섬유 시냅스 연결이 있음을 확인하였다. 정상군에 비해 모델군 쥐는 첫 번째 흑변 배출 시간이 연장되고, 배설 횟수가 감소했으며, 배변의 수분 함량과 소장 추진률이 모두 감소하였다(P<0.001, P<0.01). 혈청 및 결장에서 TH 함량이 증가하였고(P<0.01), RVLM 내 TH 및 c-Fos 양성 신경세포 수와 TH/c-Fos 공동 발현 신경세포 수가 증가하였다(P<0.001). 모델군과 비교하여 전기침군 쥐는 첫 번째 흑변 배출 시간이 단축되고, 배설 횟수가 증가하였으며, 배변 수분 함량과 소장 추진률이 증가하였다(P<0.001, P<0.01). 혈청과 결장에서 TH 함량이 감소하였고(P<0.01), RVLM 내 TH, c-Fos 양성 신경세포 수 및 TH/c-Fos 공동 발현 신경세포 수가 감소하였다(P<0.001). 공란 바이러스 + CNO군과 비교하여 억제 바이러스 + CNO군 쥐의 첫 번째 흑변 배출 시간이 단축되고, 배출 횟수가 증가하였으며, 배변 수분 함량과 소장 추진률이 증가하였다(P<0.001, P<0.01). 공란 바이러스 + CNO군과 비교하여 전기침군 쥐도 첫 번째 흑변 배출 시간이 단축되고, 배출 횟수가 증가하였으며, 배변 수분 함량과 소장 추진률이 증가하였다(P<0.001, P<0.01). 전기침군과 비교하여 활성화 바이러스 + CNO + 전기침군 쥐는 첫 번째 흑변 배출 시간이 연장되고, 배설 횟수가 감소하였으며, 배변 수분 함량과 소장 추진률이 감소하였다(P<0.001, P<0.01). 공백군과 비교하여 모델 대조군 쥐의 RVLM 뇌 영역 Ca2+ 신호 활동이 유의하게 증가하였다(P<0.001). 모델 대조군과 비교하여 모델 + 전기침군 쥐의 RVLM 뇌 영역 Ca2+ 신호 활동이 유의하게 감소하였다(P<0.001). 결론: 대장 모집혈과 하합혈인 “천추” 및 “상거허” 전기침 자극은 RVLM 뇌 영역 TH 양성 신경세포 활성을 억제하여 FC 쥐의 장 운동 장애를 개선하는 것으로 보인다.

关键词

전기침;연수 앞쪽 복측 측면 영역;타이로신 하이드록실라제 신경세포;장 운동 장애

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