전기침이 Hippo/YAP 경로 조절을 통해 기능성 소화불량 쥐의 십이지장 저염증 반응을 개선하는 작용 기전

Liang Tingting ,  

Zhao Yu ,  

Wang Tianlang ,  

Zhang Jiahao ,  

Wang Xihan ,  

Wang Xining ,  

Feng Yifan ,  

Guo Yue ,  

Liu Yunxiao ,  

Qu Yi ,  

Xue Yanan ,  

Liu Jidong ,  

摘要

목적: 전기침 ‘태충’과 ‘족삼리’가 Hippo/Yes 관련 단백질(YAP) 경로 조절을 통해 기능성 소화불량(FD) 쥐의 십이지장 저염증 반응을 개선하는 작용 기전을 명확히 하고자 하였다. 방법: 수컷 SD 쥐를 무작위 배정하여 대조군, 모델군, 전기침군으로 나누었다(n=7). 복합 유도 전략으로 FD 모델을 구축하였으며, 강제 수영, 꼬리 자극 및 식이 불규칙 처리를 동시 적용하여 21일간 진행하였다. 전기침군은 ‘태충’과 ‘족삼리’ 전기침 치료를 1일 1회, 20분씩 2개 치료 주기(각 6일, 중간 1일 간격) 시행하였다. 조작 및 치료 기간 동안 각 군 쥐의 일반 상태와 체중 변화를 관찰하였으며, 치료 종료 후 3시간 식사량, 위 배출률 및 소장 추진률을 측정하였다. 십이지장 HE 염색을 통해 점막 병리 변화 관찰, 혈청 위운동인자(MTL), 위산분비인자(GAS) 함량을 ELISA로 측정하였다. Western blot으로 십이지장 조직 내 YAP, PDZ 결합 모티프 전사 공활성 인자(TAZ), 인산화(p)-YAP, p-TAZ 단백질 발현을 확인하였다. 면역조직화학법으로 백혈구인터루킨(IL)-1β, IL-6, 종양괴사인자-α(TNF-α) 양성 발현을 측정하였고, 면역형광법으로 십이지장 조직 내 폐쇄단백질(Occludin)과 폐쇄소대단백질-1(ZO-1) 양성 발현을 확인하였다. 실시간 형광정량 PCR법으로 YAP, TAZ, B림프종-2(Bcl-2), Bcl-2 관련 X 단백질(Bax) mRNA 발현 수준을 검출하였으며, TUNEL 염색으로 십이지장 조직 세포자멸사율을 측정하였다. 결과: 대조군과 비교하여 모델군 쥐는 현저한 위축 상태를 보였으며, 눈을 가늘게 뜨고 웅크린 자세, 털이 거칠며 변이 묽었다. 체중, 3시간 식사량, 위 배출률 및 소장 추진률이 감소하였다(P<0.05, P<0.01). 십이지장 조직 고유 판에서 다량의 염증 침윤이 관찰되었고, 혈청 MTL, GAS 함량이 현저히 감소하였다(P<0.01). 십이지장 조직 내 p-YAP/YAP, p-TAZ/TAZ 단백질 발현 비율이 상승하였으며(P<0.01), IL-1β, IL-6, TNF-α 양성 발현이 증가하였다(P<0.01). Occludin, ZO-1 단백질 평균 형광 강도가 감소하였고(P<0.01), Bax mRNA 발현 수준이 상승하였으며(P<0.01), YAP, TAZ, Bcl-2 mRNA 발현 수준은 감소하였다(P<0.01). 장 상피세포 자멸사율이 증가하였다(P<0.01). 중재 후 모델군과 비교하여 전기침군 쥐는 정신이 개선되고 활동량이 증가하였으며, 털이 윤택하고 변 상태가 정상화되었다. 체중, 3시간 식사량, 위 배출률 및 소장 추진률이 증가하였다(P<0.01). 십이지장 조직 고유 판 염증 침윤이 완화되었고, 혈청 MTL, GAS 함량이 증가하였다(P<0.01). 십이지장 조직 내 p-YAP/YAP, p-TAZ/TAZ 단백질 발현 비율이 감소하였으며(P<0.01, P<0.05), IL-1β, IL-6, TNF-α 양성 발현이 감소하였다(P<0.05, P<0.01). Occludin, ZO-1 단백질 평균 형광 강도가 증가하였으며(P<0.01, P<0.05), Bax mRNA 발현 수준이 감소하였고(P<0.01), YAP, TAZ, Bcl-2 mRNA 발현 수준이 증가하였다(P<0.01, P<0.05). 장 상피세포 자멸사율이 감소하였다(P<0.01). 결론: 전기침 ‘태충’과 ‘족삼리’는 FD 증상을 유의하게 완화하고 십이지장 저염증 반응을 효과적으로 억제하며, 이는 Hippo/YAP 신호 경로 조절과 관련이 있을 것으로 보인다.

关键词

전기침; 기능성 소화불량; Hippo/YAP 경로; 저염증 반응

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