목적은 손의 열두 정혈 자침법(약칭 정혈 자침)이 인터루킨 10(IL-10)/신호 전달 및 전사 활성화 인자 1(STAT1) 경로를 통해 미세아교세포 및 대식세포 표현형 편화를 조절하여 과도한 신경 염증 반응 및 신경세포 사멸을 억제하고, 두부외상으로 인한 신경기능 결손을 개선할 수 있는지 관찰하는 것이다. 방법 본 연구는 수컷 C57BL/6 생쥐를 사용하였으며, 총 3개의 하위 실험으로 구성되었다. 전자 제어식 뇌 피질 충격기를 이용하여 외상성 두부손상(TBI) 모델을 제작하였다. 실험 1에서는 12마리의 건강한 생쥐를 가짜 수술군으로 무작위 선정하고, 성공적으로 모델이 구축된 24마리를 모델군과 정혈 자침군으로 무작위 배정하였다; 실험 2에서는 STAT1 작용제 2-NP를 이용하여 STAT1을 활성화시켜 STAT1이 정혈 자침의 항염 효과에 관여하는지 검증하였고, 모델군, 정혈 자침군, 정혈 자침+2-NP군으로 각 12마리씩 배정하였으며; 실험 3에서는 IL-10이 정혈 자침의 항염 작용에서 가지는 역할을 관찰하였고, 모델군, 정혈 자침군, 정혈 자침+IL-10 길항군으로 각 10마리씩 배정하였다. 정혈 자침군, 정혈 자침+2-NP군, 정혈 자침+IL-10 길항군 생쥐는 모델 제작 직후, 24시간, 48시간에 각각 1회씩 정혈 자침 출혈 치료를 받았다; 정혈 자침+2-NP군은 모델 제작 전 및 정혈 자침 1시간 전에 복강 내 2-NP를 주사하였으며, 정혈 자침+IL-10 길항군은 정혈 자침 1시간 후 손상된 피질 반대쪽 뇌실에 IL-10 중화항체를 주입하여 내인성 IL-10을 길항하였다. 수정된 신경 기능 결손(mNSS) 점수, 열린 필드 실험으로 신경 및 운동 기능을 평가하였으며, 면역형광법으로 손상된 피질의 사멸신경세포(NeuN⁺TUNEL⁺) 및 이온칼슘결합연결분자 1 양성 미세아교세포 비율을 측정하고, 액상칩 검출법으로 손상된 피질 염증 인자 수치를 측정하였으며, 웨스턴 블롯법으로 STAT1, 인산화(p)-STAT1 단백질 발현을 확인하였고, 유세포분석법으로 손상된 피질의 M1형 미세아교세포 및 말초 대식세포 비율을 분석하였다. 결과 가짜 수술군과 비교했을 때 모델군 마우스는 mNSS 점수 상승(P<0.01), 총 이동거리 감소(P<0.01, P<0.05), 운동 피질 M1/M2 영역의 사멸신경세포 비율 및 손상된 피질 미세아교세포 비율 증가(P<0.05, P<0.01), 손상된 피질 내 p-STAT1/STAT1 비율, IL-10, 인터루킨 2(IL-2) 수치가 증가(P<0.01)하였다. 모델군과 비교하면 정혈 자침군 마우스는 모델 제작 6시간, 48시간 후 mNSS 신경 기능 결손 점수가 감소(P<0.01, P<0.05), 48시간 시 총 이동거리가 증가(P<0.01), 세포사멸 신경세포 수 및 손상된 피질 미세아교세포 비율이 감소(P<0.05, P<0.01), 손상된 피질 내 항염증 인자인 IL-10 수치가 증가(P<0.01), IL-2 수치와 STAT1 인산화 수준이 감소(P<0.05)하였다. 정혈 자침군과 비교하면 정혈 자침+2-NP군 마우스는 mNSS 점수 및 M1형 미세아교세포 비율이 증가(P<0.01)하였고; 정혈 자침+IL-10 길항군은 mNSS 점수, p-STAT1/STAT1 비율이 증가(P<0.05, P<0.01), M1형 대식세포 및 M1형 미세아교세포 비율이 증가(P<0.05)하였다. 결론 정혈 자침법은 IL-10/STAT1 경로를 통해 미세아교세포/대식세포 M1형 편화를 억제하여 손상된 피질의 염증 반응 및 신경세포 사멸을 감소시키고, 신경 기능 결손을 개선할 수 있다.

외상성 두부손상;정혈 자침;대뇌 피질;미세아교세포;대식세포;신경 염증 반응;신호 전달 및 전사 활성화 인자 1;인터루킨 10