O objetivo deste estudo é observar o efeito do pré-tratamento por eletroacupuntura no ritmo de expressão do gene nuclear do relógio Bmal1 no tecido uterino de ratas com superovulação e investigar o mecanismo pelo qual o pré-tratamento por eletroacupuntura melhora a receptividade do endométrio durante a janela de implantação no útero de ratas com superovulação. Método: 72 ratas SD fêmeas foram divididas em três grupos - normal, modelo e pré-tratamento por eletroacupuntura, com 24 ratas em cada grupo, de acordo com o método do número aleatório. Com exceção do grupo normal, os outros dois grupos de ratas foram injetados com hormônio gonadotrofina coriônica equina por via intraperitoneal e após 48 horas foram injetados com hormônio gonadotrofina coriônica humana para preparação do modelo de superovulação. No grupo de pré-tratamento por eletroacupuntura, os pontos de acupuntura Guan Yuan e San Yin Jiao foram selecionados e a eletroacupuntura foi realizada diariamente às 21:00 durante os dois ciclos estrais anteriores à formação do modelo, por 15 minutos, terminando quando o modelo foi finalizado. As ratas do grupo normal foram acasaladas com ratos machos vasectomizados durante o estro, enquanto os outros dois grupos foram acasalados no dia da conclusão da formação do modelo. As ratas nos três grupos foram sacrificadas a cada 4 horas, a partir das 4:00, no quinto dia após o acasalamento bem-sucedido. A espessura do endométrio, o número de glândulas e vasos sanguíneos e as alterações morfológicas do tecido foram observadas por coloração HE. Os níveis de estradiol (E2) e progesterona (Pg) no soro foram medidos por ELISA. A expressão de mRNA do gene nuclear do relógio Bmal1 e dos fatores de receptividade do endométrio HoxA10 e fator inibidor de leucemia (LIF) no útero foram avaliados por PCR quantitativo em tempo real. A expressão de proteínas HoxA10 e LIF no tecido uterino foi avaliada por Western blot. Resultados: Em comparação com o grupo normal, a espessura do endométrio no grupo modelo diminuiu (P<0.01), assim como o número de glândulas e vasos sanguíneos (P<0.01, P<0.05); os picos e vales de expressão do Bmal1 no útero mostraram um ritmo oposto ao do grupo normal, com redução da expressão do mRNA de Bmal1 em 12:00 e 16:00 (P<0.01); os níveis de E2 e Pg no soro aumentaram significativamente (P<0.01, P<0.05); os níveis de expressão de mRNA e proteína de HoxA10 e LIF nos fatores de receptividade do endométrio diminuíram significativamente (P<0.01, P<0.05). Em comparação com o grupo modelo, a espessura do endométrio, o número de glândulas e vasos sanguíneos no grupo de pré-tratamento por eletroacupuntura aumentaram significativamente (P<0.05); os picos e vales de expressão do Bmal1 no útero foram restaurados, com um aumento na expressão do mRNA, especialmente às 12:00, com um aumento significativo da expressão de Bmal1 em comparação com o grupo modelo em 12:00 (P<0.05); os níveis de Pg no soro diminuíram significativamente (P<0.05); os níveis de mRNA e proteína de HoxA10 e LIF aumentaram (P<0.05, P<0.01). Conclusão: O pré-tratamento por eletroacupuntura pode melhorar a receptividade do endométrio durante a janela de implantação, e seu mecanismo pode ser a regulação do ritmo de expressão do gene nuclear do relógio Bmal1 no tecido uterino, corrigindo a desregulação do ritmo de expressão do gene do relógio causada pela superovulação.
关键词
Pré-tratamento por eletroacupuntura; superovulação controlada; ritmo dia-noite; gene do relógio; Bmal1