Efeito da regulação por eletroacupuntura da via PI3K/Akt/mTOR na autofagia do tecido sinovial do joelho em ratos com osteoartrite de joelho

ZHOU Xin-hua ,  

YANG Qi-qi ,  

LI Wei-ran ,  

WANG Ke-po ,  

Qiu Shuai-hui ,  

LI Chun-ning ,  

LI Fei ,  

摘要

Objetivo: Investigar o efeito da eletroacupuntura na regulação da via de sinalização da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)/quinase B de proteína (Akt)/proteína-alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) sobre a autofagia no tecido sinovial do joelho em ratos com osteoartrite de joelho (KOA). Métodos: 36 ratos SD machos foram selecionados e aleatoriamente divididos em grupo normal, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 12 ratos em cada grupo. O modelo KOA foi replicado pelo método do iodoacetato de sódio. Após confirmação do modelo, o grupo de eletroacupuntura recebeu tratamento nos pontos “Dubi” e “Zusanli” do lado afetado, com eletroacupuntura de 20 minutos, uma vez ao dia, durante 3 semanas consecutivas. A função do joelho dos ratos foi avaliada pela escala comportamental Lequesne MG, a morfologia patológica do tecido sinovial foi observada pela coloração HE, a ultraestrutura dos autofagossomos e autofagolisossomos no tecido sinovial foi observada por microscopia eletrônica de transmissão, os níveis das proteínas relacionadas à autofagia Atg5 e Atg12 no tecido sinovial foram detectados pelo ELISA, os níveis de expressão de mRNA de PI3K, Akt e mTOR foram medidos por PCR em tempo real quantitativo, e os níveis relativos das proteínas PI3K, Akt, mTOR, ULK1, Beclin-1 e LC3 no tecido sinovial foram avaliados por Western blot. Resultados: Comparado com o grupo normal, o grupo modelo apresentou aumento na pontuação Lequesne MG do joelho (P<0,01), proliferação de colágeno no tecido sinovial, infiltração de células inflamatórias, aumento do número de autofagossomos e autofagolisossomos, aumento nos conteúdos de Atg5 e Atg12, aumento na expressão relativa das proteínas ULK1, Beclin-1 e na relação LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), e diminuição na expressão de mRNA e proteínas PI3K, Akt e mTOR (P<0,01); comparado com o grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução na pontuação Lequesne MG (P<0,01), diminuição da proliferação de colágeno e infiltração celular inflamatória, redução no número de autofagossomos e autofagolisossomos, diminuição nos conteúdos de Atg5 e Atg12, redução na expressão relativa das proteínas ULK1, Beclin-1 e na relação LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), e aumento na expressão de mRNA e proteínas PI3K, Akt e mTOR (P<0,05, P<0,01). Conclusão: A eletroacupuntura nos pontos “Dubi” e “Zusanli” pode inibir a autofagia no tecido sinovial, melhorar a função do joelho e a morfologia do tecido sinovial em ratos com KOA, possivelmente por meio da ativação da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR.

关键词

osteoartrite de joelho;eletroacupuntura;autofagia;fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)/quinase B de proteína (Akt)/proteína-alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) via de sinalização;sinovial

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