Mecanismo da ação da eletroacupuntura nos pontos do meridiano Shaoyang do pé para melhorar a resposta inflamatória em ratos com osteoporose pós-menopausa com base na via de sinalização PI3K/AKT

LÜ Xing-min ,  

TANG Cai ,  

RONG Yi ,  

ZOU Ling-ling ,  

XU Mao-ting ,  

ZHANG Lu ,  

CHEN Gui-quan ,  

摘要

O objetivo é investigar o efeito da eletroacupuntura nos pontos do meridiano do pé Shaoyang por meio da regulação da via de sinalização da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)/proteína quinase B (AKT) na resposta inflamatória em ratos com osteoporose pós-menopausa. Métodos: 40 ratos SD foram selecionados aleatoriamente, sendo 10 designados como grupo de cirurgia simulada; os demais ratos foram submetidos à ovariectomia bilateral e, após 3 meses, foi estabelecido um modelo de osteoporose pós-menopausa, dividido aleatoriamente em grupo modelo, grupo eletroacupuntura e grupo eletroacupuntura + inibidor, com 10 ratos em cada grupo. O grupo de eletroacupuntura recebeu estimulação bilateral por eletroacupuntura nos pontos "Huantiao" e "Yanglingquan" (ondas densas e dispersas, frequência 2 Hz/15 Hz, intensidade 0,2~0,6 mA) e acupuntura em "Xuanzhong", 10 minutos por sessão, 5 vezes por semana, durante 8 semanas, alternando os lados. No grupo eletroacupuntura + inibidor, além do tratamento de eletroacupuntura, foi administrado via intraperitoneal o inibidor de PI3K LY294002 (10 mg/kg) duas vezes por semana, durante 8 semanas. A Micro-CT foi utilizada para detectar a microestrutura do tecido femoral e índices quantitativos, incluindo densidade mineral óssea (BMD), fração volumétrica óssea (BV/TV), número de trabéculas ósseas (Tb.N) e separação trabecular (Tb.Sp). A coloração HE observou a morfologia patológica do fêmur, e a coloração TRAP observou o número de osteoclastos. A imuno-histoquímica detectou a expressão dos marcadores osteogênicos Runx2, osteocalcina (OCN) e colágeno tipo I (Collagen I) no tecido ósseo. Os métodos ELISA e PCR quantitativa em tempo real analisaram os níveis séricos e teciduais e a expressão do mRNA de interleucina-1β (IL-1β), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral-α (TNF-α). O Western blot detectou a expressão das proteínas da via PI3K/AKT no tecido femoral. Resultados: no grupo modelo, as trabéculas ósseas estavam visivelmente afinadas, dispostas de forma esparsa e desordenada, com ampliação da cavidade da medula óssea e aumento acentuado no número de osteoclastos; no grupo de eletroacupuntura, a estrutura e morfologia das trabéculas ósseas melhoraram, e o número de osteoclastos diminuiu. Em comparação com o grupo simulado, o grupo modelo apresentou reduções significativas em BMD, BV/TV, Tb.N, expressão positiva de Runx2, OCN e Collagen I no tecido ósseo, e proporções de expressão proteica p-PI3K/PI3K e p-AKT/AKT significativamente reduzidas (P < 0,01), enquanto Tb.Sp e os níveis séricos e teciduais e expressão de mRNA de IL-6, IL-1β e TNF-α aumentaram significativamente (P < 0,01). Em comparação com o grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura mostrou aumentos significativos em BMD, BV/TV, Tb.N, expressão positiva de Runx2, OCN e Collagen I, e proporções p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT (P < 0,01, P < 0,05), e diminuições significativas em Tb.Sp, níveis e expressão de mRNA de IL-6, IL-1β e TNF-α (P < 0,01). Em comparação com o grupo de eletroacupuntura, os indicadores no grupo eletroacupuntura + inibidor foram revertidos exceto Tb.Sp (P < 0,01, P < 0,05). Conclusão: a eletroacupuntura nos pontos do meridiano Shaoyang do pé pode aliviar a resposta inflamatória e a perda óssea em ratos com osteoporose pós-menopausa, e seu mecanismo de ação pode estar relacionado à ativação da via PI3K/AKT.

关键词

Eletroacupuntura; pontos do meridiano Shaoyang do pé; via fosfatidilinositol 3-quinase/proteína quinase B; osteoporose; resposta inflamatória

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