A moxabustão retarda o envelhecimento ovariano em camundongos por meio da ativação da resposta a proteínas não dobradas mitocondriais

FAN Yan-liang ,  

LI Hong-xiao ,  

SHEN Mei-hong ,  

LU Ge ,  

摘要

O objetivo é explorar os possíveis mecanismos pelos quais a moxabustão pode retardar o declínio funcional ovariano em camundongos com envelhecimento natural. Quinze camundongos fêmeas SPF ICR de 2 meses com ciclos estrais regulares foram incluídos no grupo de 2 meses; 30 camundongos fêmeas SPF ICR de 10 meses foram divididos aleatoriamente nos grupos de 10 meses e de moxabustão, com 15 camundongos em cada grupo. O grupo de moxabustão recebeu aplicações intercaladas nos pontos bilaterais “Shenshu”, “Zhongwan” e “Guanyuan”, por 10 minutos cada vez, durante 21 dias consecutivos. As alterações no ciclo estral foram observadas por esfregaço vaginal; os níveis séricos de estradiol (E2), hormônio folículo-estimulante (FSH) e hormônio antimülleriano (AMH) foram medidos por ELISA; a estrutura do tecido ovariano foi observada por coloração HE; o conteúdo de ATP e o potencial de membrana mitocondrial (MMP) nas células da granulosa foram detectados por métodos fluorescentes e coloração JC-1; a expressão de mRNA e proteína das vias de sinalização da resposta à proteína não dobrada mitocondrial (UPRmt) [fator de transcrição ativado 5 (ATF5), protease ClpP e protease Lon (LONP1)] foi detectada por PCR quantitativo em tempo real, Western blot e imunohistoquímica no tecido ovariano. Em comparação com o grupo de 2 meses, a taxa de desordens do ciclo estral em camundongos de 10 meses aumentou (P <0,01), o nível sérico de FSH aumentou (P <0,01), e os níveis de E2 e AMH diminuíram (P <0,01); o número de folículos em vários estágios diminuiu significativamente (P <0,01); o conteúdo de ATP e o nível de MMP nas células da granulosa diminuíram (P <0,01); a expressão proteica, de mRNA e expressão positiva de ATF5, ClpP e LONP1 no tecido ovariano diminuíram (P <0,01). Em comparação com o grupo de 10 meses, o grupo de moxabustão teve uma diminuição na taxa de desordens do ciclo estral (P <0,01), diminuição do nível sérico de FSH (P <0,01), e aumento nos níveis de E2 e AMH (P <0,01); o número de folículos primordiais, crescentes e antrais aumentou significativamente (P <0,05, P <0,01); o conteúdo de ATP e o nível de MMP nas células da granulosa aumentaram (P <0,01); a expressão proteica, de mRNA e positiva de ATF5, ClpP e LONP1 no tecido ovariano aumentaram (P <0,01, P <0,05). Conclusão: A moxabustão pode retardar o declínio funcional ovariano em camundongos com envelhecimento natural, regulando os níveis hormonais, e seu mecanismo de ação pode estar relacionado à regulação da expressão das moléculas de sinalização UPRmt ATF5, ClpP e LONP1 e à melhoria da função mitocondrial nas células da granulosa.

关键词

envelhecimento ovariano; função mitocondrial; moxabustão; resposta a proteínas não dobradas mitocondriais; fator de transcrição ativado 5

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