Estudo do mecanismo de ação da eletroacupuntura no tratamento combinado cérebro-intestino em ratos com isquemia cerebral baseado na via TMAO-HMGB1/NLRP3

WU Yue-ping ,  

OUYANG Jie ,  

SONG Xiao-ge ,  

CHU Hao-ran ,  

CHEN Liang-liang ,  

DING Yi-xia ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura na via da trimetilamina-N-óxido (TMAO) – proteína da família da alta mobilidade B1 (HMGB1)/proteína associada ao receptor do tipo NOD com domínio estrutural de proteína de choque térmico 3 (NLRP3) em ratos com isquemia cerebral, explorando o mecanismo de ação do tratamento combinado cérebro-intestino por eletroacupuntura. Método: ratos SD adultos machos SPF foram aleatoriamente divididos em grupo sham, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 15 ratos em cada grupo. O grupo de eletroacupuntura recebeu tratamento nos pontos “Baihui”, “Tianshu”, “Shangjuxu” e “Dazhui”, uma vez a cada dois dias, 20 minutos por sessão, durante 14 dias. A avaliação da função neurológica dos ratos foi realizada pelo escore Zea-Longa; o volume do infarto cerebral foi detectado por coloração TTC; foram observadas alterações patológicas na córtex cerebral isquêmico e no tecido do cólon por coloração HE; os conteúdos de TMAO, HMGB1, NLRP3, interleucina (IL)-1β, proteína da zona oclusiva 1 (ZO-1) e ocludina (Occludin) no soro, cólon e córtex cerebral isquêmico foram detectados por ELISA; os níveis de expressão proteica, mRNA de HMGB1, NLRP3, IL-1β, ZO-1 e Occludin em tecidos do cólon e córtex cerebral isquêmico foram detectados por Western blot, PCR quantitativo em tempo real e coloração por imunofluorescência. Resultados: comparado ao grupo sham, o grupo modelo mostrou aumento da pontuação Zea-Longa e porcentagem do volume do infarto cerebral (P<0,01), desordem na disposição dos neurônios no córtex cerebral isquêmico, estrutura frouxa, espaços ampliados com infiltração celular inflamatória, destruição da mucosa do cólon, desordem na disposição das glândulas, redução do número de células caliciformes com infiltração inflamatória; níveis elevados de TMAO, HMGB1, NLRP3 e IL-1β no soro, cólon e córtex cerebral isquêmico (P<0,01), níveis diminuídos de ZO-1 e Occludin (P<0,01); expressão elevada de proteína, mRNA e expressão positiva de HMGB1, NLRP3 e IL-1β, e expressão reduzida de ZO-1 e Occludin (P<0,01). Comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou diminuição na pontuação Zea-Longa e no percentual do volume do infarto cerebral (P<0,01), neurônios com arranjo mais ordenado e morfologia relativamente intacta no córtex cerebral isquêmico, menor infiltração de células inflamatórias, células epiteliais da mucosa do cólon relativamente intactas, redução da desordem glandular e infiltração inflamatória aliviada; diminuição nos níveis de TMAO, HMGB1, NLRP3 e IL-1β no soro, cólon e córtex cerebral isquêmico (P<0,01), níveis elevados de ZO-1 e Occludin (P<0,01); diminuição na expressão de proteína, mRNA e expressão positiva de HMGB1, NLRP3 e IL-1β, e aumento da expressão de ZO-1 e Occludin (P<0,01). Conclusão: o tratamento combinado cérebro-intestino por eletroacupuntura pode reduzir o conteúdo do metabólito microbiano intestinal TMAO, rebaixar a expressão de HMGB1/NLRP3 nos tecidos intestinais, reduzir fatores inflamatórios periféricos e, assim, aliviar a resposta inflamatória nos tecidos cerebrais de ratos MCAO.

关键词

isquemia cerebral; eletroacupuntura; ratos; tratamento combinado cérebro-intestino; resposta inflamatória; via TMAO-HMGB1/NLRP3

阅读全文