Efeito da moxabustão "Wen Yang Tong Mai" na função endotelial de camundongos com aterosclerose ApoE-/- via via de sinalização PI3K/Akt/mTOR

ZHU Zhou ,  

PAN Li ,  

YAN Zhao-bo ,  

ZHANG Ning ,  

YANG Zhi-hong ,  

XIONG Jiao-jiao ,  

YANG Xiao-fang ,  

摘要

O objetivo do estudo foi investigar o efeito do método de moxabustão "Wen Yang Tong Mai" na via de sinalização da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)/proteína quinase B (Akt)/proteína alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) e nos fatores relacionados à função endotelial em camundongos com aterosclerose (AS). O estudo explorou o possível mecanismo da moxabustão "Wen Yang Tong Mai" para prevenir e tratar AS por meio da inibição da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR. Métodos: 30 camundongos machos ApoE-/- foram aleatoriamente divididos em grupo modelo, grupo de moxabustão e grupo de moxabustão + agonista, com 10 camundongos em cada grupo, alimentados com dieta rica em gorduras por 12 semanas para replicar o modelo de AS. 10 camundongos machos C57BL/6J foram usados como grupo controle, alimentados com dieta normal por 12 semanas. As intervenções começaram no primeiro dia após a modelagem: os grupos controle e modelo foram apenas capturados e fixados; o grupo de moxabustão recebeu intervenção nos pontos "Dan Zhong", "Shen Que" e bilateralmente "Nei Guan" e "Xue Hai" durante 30 minutos por sessão; o grupo de moxabustão + agonista recebeu injeção intraperitoneal de 740Y-P (5 μmol·kg-1·d-1) 30 minutos antes da moxabustão. Cada grupo recebeu intervenção 5 dias por semana durante 12 semanas consecutivas. Observou-se a condição geral e a massa corporal dos camundongos; análises bioquímicas determinaram os níveis séricos de triglicerídeos (TG), colesterol total (TC), lipoproteína de baixa densidade (LDL-C) e lipoproteína de alta densidade (HDL-C); a morfologia patológica da aorta torácica foi observada por coloração HE; os níveis séricos de óxido nítrico (NO) e endotelina-1 (ET-1) foram medidos por ELISA; o conteúdo de espécies reativas de oxigênio (ROS) na aorta foi detectado por citometria de fluxo; a expressão de mRNA e proteínas de PI3K, Akt, mTOR e sintase de óxido nítrico endotelial (eNOS) no tecido da aorta foi avaliada por qPCR e Western blot. Em comparação ao grupo controle, o grupo modelo apresentou aumentos significativos na massa corporal e nos níveis séricos de TC, TG e LDL-C nas semanas 8 e 12 (P<0,05, P<0,01), redução significativa nos níveis de HDL-C e NO sérico (P<0,01); a superfície interna do arco aórtico estava irregular, com espessamento da íntima e proliferação de "placas"; níveis séricos de ET-1, conteúdo de ROS na aorta, expressão de mRNA de mTOR e as razões de proteínas p-PI3K/PI3K e p-mTOR/mTOR aumentaram significativamente (P<0,01), enquanto a expressão de mRNA e proteína eNOS e a razão p-Akt/Akt diminuiu significativamente (P<0,01, P<0,05). Comparado ao grupo modelo, o grupo moxabustão apresentou descamação ocasional das células da íntima no arco aórtico sem alterações patológicas evidentes, e os demais indicadores foram revertidos, exceto HDL-C (P<0,01, P<0,05). Comparado ao grupo moxabustão, o grupo moxabustão + agonista apresentou aumentos significativos nos níveis séricos de TC, TG e LDL-C (P<0,01, P<0,05), presença de pequenas ou mínimas proliferacões de "placas" no arco aórtico, descamação ocasional das células endoteliais da íntima; diminuição nos níveis de NO sérico (P<0,05), aumentos significativos nos níveis séricos de ET-1, conteúdo de ROS na aorta e razões de proteínas p-PI3K/PI3K e p-mTOR/mTOR (P<0,01, P<0,05); além de diminuições significativas na expressão de mRNA e proteína eNOS e na razão p-Akt/Akt (P<0,01, P<0,05). Conclusão: a moxabustão "Wen Yang Tong Mai" pode reduzir a massa corporal de camundongos ApoE-/- com AS, melhorar a dislipidemia, reparar lesões endoteliais da aorta e aliviar os sintomas de AS, possivelmente regulando a via de sinalização PI3K/Akt/mTOR e influenciando a resposta ao estresse oxidativo para proteger a função endotelial.

关键词

moxabustão "Wen Yang Tong Mai"; aterosclerose; via de sinalização fosfatidilinositol 3-quinase/proteína quinase B/proteína alvo da rapamicina em mamíferos; espécies reativas de oxigênio; função endotelial; estresse oxidativo

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