Efeito da eletroacupuntura na polarização das microglías e via de sinalização α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB no córtex cingulado anterior de ratos com dor inflamatória crônica e depressão comórbida

WANG Tian ,  

YANG Pu ,  

ZHANG Xi ,  

XU Hui ,  

HUANG Wen-jing ,  

LI Xin ,  

HUANG Xin-yu ,  

ZHENG Guang-mei ,  

XU Zhi-yi ,  

YIN Li-li ,  

HUANG Ying ,  

SU Sheng-yong ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura na polarização das microglías no córtex cingulado anterior (ACC) de ratos com dor inflamatória crônica com comorbidade depressiva (CIPDC), através da via de sinalização do receptor nicotínico de acetilcolina α7 (α7nAChR)-TLR4/fator nuclear κB (NF-κB), e explorar o mecanismo central de "analgesia-antidepressão" da eletroacupuntura. Métodos: 45 ratos machos SD de grau SPF foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 15 ratos em cada. O modelo CIPDC foi estabelecido por injeção plantar do adjuvante completo de Freund. No 14º dia pós-modelagem, o grupo de eletroacupuntura recebeu intervenção diária de eletroacupuntura por 20 minutos, durante 14 dias consecutivos. Nos dias 0, 14 e 28 após a modelagem, o comportamento de dor foi avaliado pelo limiar de retirada mecânica (MWT) e latência de retirada térmica (TWL); o comportamento depressivo foi avaliado com o teste de preferência por água açucarada, teste de nado forçado e campo aberto; observações morfológicas do tecido ACC foram feitas com coloração HE; níveis de TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-4, IL-10 no tecido ACC foram medidos por ELISA; duplo coloração imunofluorescente detectou a coexpressão dos marcadores CD86/Iba-1 da microglia tipo M1 e CD206/Iba-1 da microglia tipo M2 em ACC; Western blot determinou os níveis de proteína α7nAChR, TLR4, MyD88, NF-κB p65 e fosforilada (p)-NF-κB p65 no ACC. Resultados: Comparado ao grupo controle, o grupo modelo apresentou diminuição significativa em MWT, TWL, taxa de preferência por água açucarada, distância total percorrida e tempo tido no centro em teste de campo aberto (P<0.05), e aumento do tempo de imobilidade no teste de nado forçado (P<0.05); houve desorganização do tecido ACC, contração neuronal intensa e coloração profunda, presença de vacúolos e emaranhados de fibras nervosas; aumento significativo da expressão de TNF-α, IL-1β e IL-6 (P<0.05) e redução significativa de IL-4 e IL-10 (P<0.05); aumento notável da expressão CD86/Iba-1 (microglia M1) e redução em CD206/Iba-1 (microglia M2) (P<0.05); expressão de proteína α7nAChR significativamente reduzida (P<0.05), enquanto TLR4, MyD88, p-NF-κB p65 e a razão p-NF-κB p65/NF-κB p65 aumentaram significativamente (P<0.05). Em comparação ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura teve aumentos significativos em MWT, TWL, taxa de preferência por água açucarada, distância total e tempo no centro no teste de campo aberto (P<0.05), e diminuição marcante no tempo de imobilidade no teste de nado forçado (P<0.05); apenas leve contração e coloração neuronal foram observadas no ACC, com redução do espaço entre neurônios e tecido; diminuição significativa em TNF-α, IL-1β e IL-6 (P<0.05) e aumento significativo em IL-4 e IL-10 (P<0.05); diminuição notável em CD86/Iba-1 e aumento em CD206/Iba-1 (P<0.05); aumento significativo na expressão de α7nAChR e reduções em TLR4, MyD88, p-NF-κB p65 e na razão p-NF-κB p65/NF-κB p65 (P<0.05). Conclusão: A eletroacupuntura exerce efeito central de "analgesia-antidepressão" em ratos CIPDC, possivelmente relacionado à polarização das microglías mediada pela via de sinalização α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB no ACC, aliviando a resposta inflamatória central e reduzindo o dano neuronal no ACC.

关键词

eletroacupuntura; dor inflamatória crônica e depressão comórbida; via de sinalização α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB; polarização das microglías; córtex cingulado anterior; resposta inflamatória

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