Efeito da eletroacupuntura na mielina do hipocampo e na via de sinalização Rac1/PAK1/LIMK1/cofilina em camundongos de envelhecimento rápido

HUANG Jun-yan ,  

DONG Wei-guo ,  

GUO Wan-qing ,  

YANG Shao-min ,  

HUANG Sheng-tao ,  

HUANG Yun ,  

ZHAN Si-jie ,  

LIN Lan ,  

WANG Feng ,  

LIU Ling-long ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura na capacidade de aprendizagem e memória de camundongos SAMP8 de envelhecimento rápido, na mielina na região do hipocampo e na via de sinalização associada ao substrato da toxina botulínica C3 relacionado a RAS1 (Rac1) / quinase ativada por P21 (PAK1) / quinase LIM1 (LIMK1) / cofilina sob a perspectiva do citoesqueleto, para explorar o mecanismo de ação da eletroacupuntura na melhora da doença de Alzheimer. Método: camundongos machos SAMP8 com 8 meses de idade foram divididos aleatoriamente em grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, cada um com 9 camundongos; 9 camundongos machos SAMR1 da mesma idade foram usados como grupo controle. O grupo eletroacupuntura recebeu eletroacupuntura nos pontos "Dazhui" e "Shenshu", com punção no "Baihui", 20 minutos por sessão, uma vez por dia, por 8 dias como um ciclo, totalizando 3 ciclos. O labirinto aquático de Morris foi utilizado para testar a capacidade de aprendizagem e memória dos camundongos; a coloração LFB foi usada para observar a estrutura da mielina na região do hipocampo; a coloração com ciclopeptídeo observou o citoesqueleto no hipocampo; a PCR quantitativa em tempo real foi usada para detectar os níveis de expressão de mRNA de Rac1, PAK1, LIMK1 e cofilina no tecido do hipocampo; e o Western blot foi utilizado para detectar a expressão proteica de proteína básica da mielina (MBP), Rac1, PAK1, P-PAK1, LIMK1, P-LIMK1, cofilina e P-cofilina no tecido do hipocampo. Resultados: comparado ao grupo controle, o grupo modelo apresentou um prolongamento do tempo latente de fuga (P<0.01), redução no número de passagens sobre a plataforma original e tempo de permanência no quadrante original (P<0.01); a coloração LFB no hipocampo tornou-se mais clara, com disposição frouxa das fibras; a intensidade da fluorescência do citoesqueleto diminuiu (P<0.01); os níveis de expressão de mRNA de Rac1, PAK1, LIMK1, cofilina, a expressão relativa das proteínas MBP, Rac1 e as razões p-PAK1/PAK1, p-LIMK1/LIMK1, p-cofilina/cofilina foram todas reduzidas (P<0.01). Em comparação com o grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou encurtamento do tempo latente de fuga (P<0.01, P<0.05), aumento no número de passagens sobre a plataforma original e no tempo de permanência no quadrante original (P<0.01); a coloração LFB tornou-se mais intensa, as fibras de mielina estavam organizadas; a intensidade da fluorescência do citoesqueleto aumentou (P<0.01); e os níveis de expressão de mRNA e expressão relativa das proteínas aumentaram (P<0.01, P<0.05). Conclusão: a eletroacupuntura pode melhorar a capacidade de aprendizagem e memória de camundongos SAMP8, e seu mecanismo pode estar relacionado à ativação da via de sinalização Rac1/PAK1/LIMK1/cofilina, promovendo a reorganização do citoesqueleto e afetando a função da mielina.

关键词

doença de Alzheimer; eletroacupuntura; mielina; citoesqueleto; toxina botulínica C3 associada a RAS1 / quinase ativada por P21 / quinase LIM1 / via de sinalização cofilina

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