Mecanismo da eletroacupuntura na melhoria do dano inflamatório miocárdico em ratos com isquemia miocárdica através da via de sinalização JAK1/STAT3 com base na homeostase de células Th17/Treg

KAN Yu-hong ,  

CAO Xiao-min ,  

SA Zhe-yan ,  

SHANG Xin-yu ,  

GAO Hui-min ,  

XU Jin-sen ,  

DONG Ya-qin ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura na homeostase das células T auxiliares 17 (Th17) / células T reguladoras (Treg) no tecido miocárdico de ratos com isquemia miocárdica (MI), bem como a expressão das proteínas chave na via de sinalização Janus quinase 1 (JAK1) / fator de ativação da sinalização e transcrição 3 (STAT3) relacionadas à inflamação, para explorar o mecanismo pelo qual a eletroacupuntura melhora o dano inflamatório após MI. Métodos: Ratos SD foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 6 ratos em cada grupo. Os grupos modelo e de eletroacupuntura receberam injeções subcutâneas multiponto de cloridrato de isoprenalina (5 mg∙kg-1∙d-1) por 7 dias consecutivos para estabelecer o modelo de MI. O grupo de eletroacupuntura recebeu tratamento nos pontos “Neiguan” e “Zusanli” durante 20 minutos por sessão, uma vez ao dia, durante 21 dias. O eletrocardiograma registrou a elevação do segmento ST e a amplitude da onda T dos ratos; a coloração HE observou alterações patológicas no tecido miocárdico; a coloração de Masson observou a deposição de colágeno nas células do miocárdio; o método ELISA mediu os níveis de fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-17 (IL-17) e interleucina-10 (IL-10) no soro e tecido miocárdico; a citometria de fluxo determinou a proporção das células Th17 e Treg no tecido miocárdico; o método Western blot detectou os níveis de expressão proteica de JAK1, STAT3, fosforilação (p)-STAT3, receptor órfão associado ao ácido retinoico α (RORα), fator de transcrição do tipo cabeça de chave 3 (Foxp3) e inibidor da sinalização de citocinas 3 (SOCS3) no tecido miocárdico. Resultados: Em comparação com o grupo controle, o grupo modelo apresentou aumento na elevação do segmento ST e amplitude da onda T (P<0,01); lesão inflamatória evidente no tecido miocárdico com extensa lise de células miocárdicas e proliferação de tecido fibrótico; a coloração de Masson mostrou aumento na quantidade de fibras de colágeno e fração volumétrica de colágeno (CVF) (P<0,01); aumento do conteúdo de TNF-α e IL-17 no tecido miocárdico e no soro (P<0,01), diminuição do IL-10 (P<0,01); diminuição da proporção de células Treg no tecido miocárdico (P<0,01), aumento da relação Th17/Treg (P<0,01); níveis elevados de expressão de JAK1, STAT3, p-STAT3 e RORα (P<0,01, P<0,05), níveis reduzidos de Foxp3 e SOCS3 (P<0,05). Em comparação com o grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou diminuição na elevação do segmento ST e amplitude da onda T (P<0,05); alívio da lesão inflamatória no tecido miocárdico, redução significativa na quantidade de fibras de colágeno e diminuição da CVF (P<0,01); redução no conteúdo de TNF-α e IL-17 no tecido miocárdico e no soro (P<0,05, P<0,01), aumento do IL-10 (P<0,01); diminuição significativa na proporção de células Th17 (P<0,01), aumento na proporção de células Treg (P<0,01), diminuição da relação Th17/Treg (P<0,01); diminuição nos níveis de expressão de JAK1, STAT3, p-STAT3 e RORα (P<0,01, P<0,05), aumento nos níveis de Foxp3 e SOCS3 (P<0,01). Conclusão: A eletroacupuntura nos pontos “Neiguan” e “Zusanli” pode melhorar a lesão inflamatória miocárdica em ratos com MI, e seu mecanismo pode estar relacionado à regulação positiva da homeostase das células Th17 / Treg no tecido miocárdico através da via de sinalização JAK1 / STAT3, equilibrando a secreção dos fatores pró-inflamatórios TNF-α, IL-17 e do fator anti-inflamatório IL-10, diminuindo assim o dano inflamatório.

关键词

eletroacupuntura; isquemia miocárdica; dano inflamatório; células T auxiliares 17 / células T reguladoras; via de sinalização Janus quinase 1 / fator de ativação da sinalização e transcrição 3

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