Mecanismos do efeito da eletroacupuntura no ponto "Zusanli" na restauração da homeostase glicêmica em pré-diabetes

LI Ya-jing ,  

ZHU Rong-jin ,  

SU Yang-shuai ,  

LI Tong ,  

LIU Xiao-yu ,  

WANG Li-li ,  

JING Xiang-hong ,  

摘要

O objetivo foi observar o efeito da eletroacupuntura no ponto "Zusanli" na regulação da glicemia em camundongos com hiperglicemia aguda, pré-diabetes de baixo risco e alto risco, e explorar preliminarmente o mecanismo pelo qual a eletroacupuntura regula a função das células β das ilhotas pancreáticas no pré-diabetes de baixo risco. Métodos: este estudo foi dividido em três partes experimentais: hiperglicemia aguda, pré-diabetes de baixo risco e pré-diabetes de alto risco. Em cada parte experimental, camundongos C57BL/6J foram distribuídos aleatoriamente em grupos normal, modelo e eletroacupuntura. Nos experimentos de hiperglicemia aguda e pré-diabetes de alto risco, havia 6 camundongos por grupo, e no experimento de pré-diabetes de baixo risco, 18 camundongos por grupo. No experimento de hiperglicemia aguda, o modelo foi preparado por injeção intraperitoneal de solução de glicose a 2 g/kg; o grupo de eletroacupuntura recebeu uma intervenção de eletroacupuntura uma vez nos dois pontos "Zusanli", bilaterais, durante 20 minutos. No pré-diabetes de baixo risco, o modelo foi preparado com alimentação rica em gorduras por 1 semana; a partir do 4º dia, quando o nível de glicemia pré-diabética deteriorada foi atingido, o grupo de eletroacupuntura recebeu intervenções diárias com os mesmos parâmetros por 4 vezes. No pré-diabetes de alto risco, o modelo foi preparado com alimentação rica em gorduras por 8 semanas; após 4 semanas da indução do modelo, o grupo de eletroacupuntura recebeu intervenções 3 vezes por semana, totalizando 12 sessões, com os mesmos parâmetros. A glicemia e a tolerância à glicose foram medidas com um glicosímetro; a glicação da hemoglobina sérica, insulina e glucagon foram medidas por ELISA; a morfologia pancreática foi observada por coloração HE; as células β das ilhotas foram isoladas e a expressão dos marcadores foi detectada por PCR; os níveis de expressão das proteínas relacionadas ao estresse do retículo endoplasmático (ATF6, ERN1, EIF2AK3), senescência celular (P21) e receptores de acetilcolina (M2-AchR, M3-AchR) foram detectados por Western blot; a coloração por imunofluorescência foi usada para detectar o marcador de senescência P21 no tecido pancreático e os neurônios colocalizados ChAT+/c-fos+ nos gânglios pancreáticos e no núcleo dorsal do nervo vago (DMV). Resultados: no experimento de hiperglicemia aguda, comparado ao grupo normal, o grupo modelo teve aumento da glicose (P<0,001) e insulina sérica (P<0,05); comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução da glicose nos 30 e 60 minutos (P<0,01) e aumento da insulina sérica (P<0,05). No pré-diabetes de baixo risco, comparado ao grupo normal, o grupo modelo mostrou aumento da glicose no terceiro dia (P<0,001), aumento da tolerância à glicose (P<0,05, P<0,01), redução na expressão das proteínas dos receptores de acetilcolina M2-AchR e M3-AchR nas células β (P<0,05), aumento na expressão das proteínas ATF6, ERN1, EIF2AK3 (P<0,01, P<0,05), aumento nas proteínas P21 (P<0,05) e aumento no número de células marcadas em conjunto Insulin+/P21+ (P<0,01); comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução da glicose nos dias 4, 6 e 7 (P<0,001, P<0,01), redução da tolerância à glicose (P<0,05, P<0,01), aumento da insulina sérica (P<0,05), aumento de neurônios colocalizados ChAT+/c-fos+ nos gânglios pancreáticos e DMV (P<0,05), aumento na expressão proteica dos receptores M2-AchR e M3-AchR (P<0,01, P<0,05), redução na expressão das proteínas ATF6, ERN1, EIF2AK3 (P<0,01, P<0,05), redução nas proteínas P21 (P<0,05) e redução no número de células marcadas conjuntamente Insulin+/P21+ (P<0,01). No pré-diabetes de alto risco, comparado ao grupo normal, o grupo modelo apresentou aumento da glicose após 1 semana de indução (P<0,001), aumento da tolerância à glicose (P<0,05, P<0,01), aumento da hemoglobina glicada sérica (P<0,05), aumento do volume das ilhotas, aumento da insulina sérica (P<0,01) e redução do glucagon sérico (P<0,05); comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução da glicose nas semanas 5 e 6 (P<0,01, P<0,05), leve diminuição do volume das ilhotas e redução tanto da insulina quanto do glucagon séricos (P<0,01, P<0,05). Conclusão: a eletroacupuntura no ponto "Zusanli" pode restaurar a homeostase da glicose, com um efeito ótimo na fase de pré-diabetes de baixo risco, e seu mecanismo pode estar relacionado à ativação do nervo vago e à inibição do estresse do retículo endoplasmático nas células β das ilhotas pancreáticas.

关键词

eletroacupuntura; Zusanli; pré-diabetes; nervo vago; estresse do retículo endoplasmático

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