Efeito da eletroacupuntura em proteínas relacionadas à resposta a proteínas mal dobradas mitocondriais no cólon de camundongos com constipação funcional

Wang Wen ,  

Li Yanqiu ,  

Zeng Weijian ,  

Yan Xiangyun ,  

He Zhaoxuan ,  

Xiao Xianjun ,  

Li Ying ,  

Yao Junpeng ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura nos pontos "Tianshu" e "Shangjuxu" na expressão das proteínas relacionadas à resposta de proteínas mal dobradas mitocondriais (UPRmt) no cólon de camundongos modelo de constipação funcional (FC), e explorar o possível mecanismo pelo qual a eletroacupuntura melhora os sintomas de FC. Métodos: 18 camundongos machos C57BL/6J foram aleatoriamente divididos em grupo controle, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 6 camundongos em cada grupo. O modelo de FC foi estabelecido por administração oral de loperamida durante 14 dias. No grupo de eletroacupuntura, foi aplicada intervenção alternada unilateral nos pontos "Tianshu" e "Shangjuxu" (ondas densas e espaçadas, 3 Hz/15 Hz), com tratamento contínuo 5 vezes por semana, totalizando 10 intervenções, enquanto os grupos controle e modelo foram apenas fixados. A função gastrointestinal dos camundongos foi avaliada pelo tempo de expulsão da primeira fezes azuis, número de partículas fecais em 6 horas, escore das características das fezes, teor de água fecal e taxa de trânsito intestinal delgado. As alterações patológicas do tecido do cólon foram observadas por coloração HE, a ultraestrutura mitocondrial por microscopia eletrônica de transmissão, o potencial de membrana mitocondrial e níveis de ROS (mtROS) por citometria de fluxo, o conteúdo de ATP mitocondrial por método colorimétrico e a expressão das moléculas-chave do UPRmt HSP60 (proteína de choque térmico 60) e LONP1 (protease LON) no tecido do cólon por imunohistoquímica. Resultados: em comparação com o grupo controle, o grupo modelo apresentou tempo prolongado para expulsão da primeira fezes azuis (P<0,01), redução no número de partículas fecais em 6 horas (P<0,01), diminuição do escore das características das fezes, teor de água fecal e taxa de trânsito intestinal delgado (P<0,01, P<0,05), edema mitocondrial evidente no tecido do cólon, danos na membrana, fraturas severas nas cristas, redução do potencial de membrana mitocondrial (P<0,01), diminuição do conteúdo de ATP (P<0,01), aumento do nível de mtROS (P<0,01) e redução da expressão positiva das proteínas HSP60 e LONP1 em células musculares lisas do cólon (SMC) (P<0,01). Após intervenção, comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução no tempo para expulsão da primeira fezes azuis (P<0,01), aumento no número de partículas fecais em 6 horas (P<0,01), elevação do escore das características das fezes, teor de água fecal e taxa de trânsito intestinal (P<0,01, P<0,05), edema mitocondrial leve no tecido do cólon, melhora evidente nos danos da membrana e das cristas, aumento do potencial de membrana mitocondrial (P<0,01), elevação do nível de ATP (P<0,01), redução do nível de mtROS (P<0,01) e aumento da expressão positiva de HSP60 e LONP1 em SMC (P<0,05). Conclusão: A eletroacupuntura nos pontos "Tianshu" e "Shangjuxu" pode promover eficazmente a função do trânsito intestinal em camundongos com FC, reparar a estrutura e função mitocondrial em células musculares lisas do cólon, possivelmente por meio da regulação ascendente da expressão de HSP60 e LONP1 em SMC, ativando assim a UPRmt relacionada.

关键词

eletroacupuntura; constipação funcional; mitocôndrias; resposta a proteínas mal dobradas; proteína de choque térmico 60; protease LON

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