O objetivo é observar o papel dos neurônios com tirosina hidroxilase (TH) no núcleo do trato solitário (NTS) e no locus coeruleus (LC) na melhora do dano da barreira hematoencefálica (BBB) em camundongos APP/PS1 por acupuntura elétrica, explorando o mecanismo do circuito neural NTS^TH-LC na prevenção e tratamento da doença de Alzheimer (AD) por acupuntura elétrica. Métodos (1) Oito camundongos machos C57BL/6 com 4 meses foram usados como grupo controle, 16 camundongos machos APP/PS1 da mesma idade foram divididos aleatoriamente em grupo modelo e grupo acupuntura elétrica (n=8). O grupo acupuntura elétrica recebeu estímulo nos pontos “Neiguan” e “Jianshi” a cada dois dias durante 4 semanas. Após a intervenção, as capacidades de aprendizagem e memória foram avaliadas pelo labirinto aquático de Morris e pelo teste de reconhecimento de objetos novos, os níveis de expressão das proteínas Occludin, Claudin-5 e ZO-1 no hipocampo foram detectados por Western blot, e a co-localização de TH/c-Fos no NTS e LC, bem como TH/noradrenalina (NE) no LC foram avaliadas por imunofluorescência. (2) Cinco camundongos TH-cre receberam injeção de vírus traçador retrógrado no LC para observar se os neurônios TH no NTS projetam para o LC. (3) Vinte e um camundongos APP/PS1 com 7 meses receberam injeção de vírus de ativação quimiogenética (AAV2/9-hSyn-DIO-hM3D-mCherry-WPRE-hGH-pA) ou vírus vazio (AAV2/9-Ef1α-DIO-mCherry-WPRE-hGH-pA) no NTS, e vírus AAVretro-TH-CRE-WPRE-hGH-pA no LC. Após 21 dias de expressão viral, os camundongos injetados com vírus vazio (n=6) receberam tratamento vírus vazio + clorpromazina-N-óxido (CNO) + acupuntura elétrica (mCherry+CNO+EA); 3 camundongos do grupo com vírus ativado foram usados para validação da função viral por registros eletrofisiológicos; os camundongos restantes foram divididos aleatoriamente em 2 grupos (n=6): vírus ativado + CNO + acupuntura elétrica (hM3D+CNO+EA) e vírus ativado + soro fisiológico + acupuntura elétrica (hM3D+saline+EA), com acupuntura elétrica diária nos pontos “Neiguan” e “Jianshi” durante 15 dias. Após a intervenção, as capacidades de aprendizagem e memória foram avaliadas, a permeabilidade da BBB no tecido cerebral foi detectada por coloração com EB, e a co-localização de TH/c-Fos e TH/NE no LC foi avaliada por imunofluorescência. Resultados (1) Comparado ao grupo controle, o grupo modelo apresentou diminuição significativa das capacidades de aprendizagem e memória (P<0.01), redução notável das proteínas Occludin, Claudin-5 e ZO-1 no hipocampo (P<0.01), e aumento significativo da co-localização TH/c-Fos no NTS e LC, assim como TH/NE no LC (P<0.01). Comparado ao grupo modelo, o grupo acupuntura elétrica mostrou melhoria nas capacidades de aprendizagem e memória (P<0.05, P<0.01), aumento significativo das proteínas Occludin, Claudin-5 e ZO-1 (P<0.01), e redução da co-localização TH/c-Fos e TH/NE (P<0.01, P<0.05). (2) O vírus traçador retrógrado confirmou que os neurônios TH no NTS projetam para o LC. (3) Comparado aos grupos mCherry+CNO+EA e hM3D+saline+EA, o grupo hM3D+CNO+EA apresentou diminuição significativa das capacidades de aprendizagem e memória (P<0.01), aumento do conteúdo de EB no tecido cerebral, e aumento significativo da co-localização TH/c-Fos e TH/NE no LC (P<0.01). Conclusão A acupuntura elétrica nos pontos “Neiguan” e “Jianshi” pode melhorar o dano da BBB e os déficits de aprendizagem e memória em camundongos AD, possivelmente relacionada à inibição da ativação do circuito neural NTS^TH-LC.

Doença de Alzheimer; acupuntura elétrica; núcleo do trato solitário; locus coeruleus; neurônios de tirosina hidroxilase; noradrenalina; barreira hematoencefálica