Eletroacupuntura no “Zusanli” alivia lesões da mucosa do cólon após quimioterapia 5-FU em camundongos com tumor colorretal transplantado e seu efeito nas proteínas NF-κB e AQP8

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

Objetivo: Observar o efeito da eletroacupuntura no ponto “Zusanli” sobre lesões da mucosa do cólon após quimioterapia com 5-fluorouracil (5-FU) em camundongos com tumor colorretal transplantado, bem como seu impacto na expressão do fator nuclear κB (NF-κB) e da proteína aquaporina 8 (AQP8), explorando seu possível mecanismo de ação. Métodos: Foi estabelecido um modelo animal de tumor colorretal transplantado por injeção subcutânea da linhagem celular CT26 em camundongos BALB/c. Quando o volume tumoral atingiu 100~300 mm3, os camundongos modelados com sucesso foram divididos aleatoriamente em grupos portadores de tumor, quimioterapia e quimioterapia + eletroacupuntura, com 6 camundongos em cada grupo. Outros 6 camundongos BALB/c normais foram usados como grupo normal. Os grupos quimioterapia e quimioterapia + eletroacupuntura receberam injeções intraperitoneais de solução de 5-FU (50 mg/kg, 0,01 mL/g) uma vez ao dia durante 5 dias; o grupo quimioterapia + eletroacupuntura recebeu também eletroacupuntura bilateral no ponto “Zusanli” com onda contínua, frequência de 2 Hz, intensidade de 1~2 mA, 5 minutos por sessão, durante 5 dias consecutivos. Durante o experimento, o índice de atividade da doença (DAI) dos camundongos foi avaliado diariamente; o volume tumoral foi medido uma vez por dia; após a coleta, foi medida a massa tumoral e o comprimento do cólon; a morfologia do tecido do cólon foi observada pela coloração HE; os conteúdos séricos de diaminoxidase (DAO) e ácido d-lático (D-LA) foram detectados por ELISA; a expressão positiva de AQP8 no cólon foi avaliada por imunohistoquímica; a translocação nuclear do NF-κB no cólon foi detectada por imunofluorescência; os níveis de expressão das proteínas NF-κB e AQP8 no cólon foram detectados por Western blot. Resultados: Comparado com o grupo normal, o grupo portador de tumor não apresentou diferenças estatísticas significativas (o volume e a massa tumoral não foram comparados). Em comparação com o grupo portador de tumor, o grupo quimioterapia apresentou aumento na pontuação do DAI (P<0.05), redução no comprimento do cólon, volume e massa tumoral (P<0.05), aumento nos conteúdos séricos de DAO e D-LA (P<0.05), aumento da expressão e translocação nuclear da proteína NF-κB no cólon (P<0.05), e redução nos níveis de expressão da proteína AQP8 nos tecidos do cólon (P<0.05). Em comparação com o grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou redução na pontuação do DAI e nos conteúdos séricos de DAO e D-LA (P<0.05), diminuição da expressão e translocação nuclear da NF-κB (P<0.05), e aumento na expressão da proteína AQP8 no cólon (P<0.05). A coloração HE mostrou que a estrutura tecidual do cólon nos grupos normal e portador de tumor não apresentava anormalidades, enquanto o grupo quimioterapia apresentou lesões patológicas do tecido do cólon, como destruição das criptas e infiltração de células inflamatórias; em comparação com o grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou aumento no comprimento das vilosidades, melhora na desordem celular tecidual e redução da infiltração inflamatória. Conclusão: A eletroacupuntura no ponto “Zusanli” pode inibir a ativação excessiva da via de sinalização NF-κB induzida pela quimioterapia com 5-FU em camundongos portadores de tumor, aumentar a expressão da proteína AQP8, reduzir o dano da mucosa intestinal, diminuir a liberação de DAO e D-LA, e assim manter a função da barreira intestinal.

关键词

eletroacupuntura; câncer colorretal transplantado; 5-fluorouracil; lesões da mucosa intestinal; tecido do cólon; fator nuclear κB; proteína aquaporina 8

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