Efeito da eletroacupuntura “Zusanli” na atenuação do dano da mucosa do cólon em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal após quimioterapia com 5-FU e seu impacto nas proteínas NF-κB e AQP8
Objetivo: observar o efeito da eletroacupuntura no ponto “Zusanli” sobre o dano da mucosa do cólon em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal após quimioterapia com 5-fluorouracil (5-FU), bem como sobre as proteínas fator nuclear κB (NF-κB) e aquaporina 8 (AQP8), explorando seu possível mecanismo de ação. Método: foram selecionados camundongos BALB/c submetidos a injeção subcutânea da linha celular de câncer colorretal CT26 para estabelecer um modelo animal de tumor transplantado. Quando o tumor atingiu 100~300 mm3, os camundongos com modelo estabelecido foram divididos aleatoriamente em grupo portador de tumor, grupo quimioterapia e grupo quimioterapia + eletroacupuntura, com 6 animais em cada grupo. Outros 6 camundongos BALB/c normais foram usados como grupo controle. Os grupos quimioterapia e quimioterapia + eletroacupuntura receberam injeção intraperitoneal de solução de 5-FU (50 mg/kg, 0,01 mL/g), uma vez ao dia, por 5 dias; o grupo quimioterapia + eletroacupuntura recebeu eletroacupuntura bilateral no ponto “Zusanli” diariamente, logo após a quimioterapia, utilizando onda contínua, frequência de 2 Hz, intensidade de 1~2 mA, 5 minutos por sessão, por 5 dias consecutivos. Durante o experimento, o índice de atividade da doença (DAI) dos camundongos foi avaliado diariamente; o volume tumoral foi medido uma vez ao dia durante a intervenção; após a coleta, mediram-se a massa tumoral e o comprimento do cólon; a morfologia do tecido colônico foi observada por coloração HE; os níveis séricos de diaminooxidase (DAO) e ácido D-lático (D-LA) foram detectados por ELISA; a expressão da proteína AQP8 no cólon foi avaliada por imunohistoquímica; a translocação nuclear do NF-κB no cólon foi detectada por imunofluorescência; os níveis de expressão das proteínas NF-κB e AQP8 no cólon foram medidos por Western blot. Resultados: em comparação ao grupo normal, não houve diferença estatística nos índices do grupo portador de tumor. Em comparação ao grupo portador, o escore DAI aumentou no grupo quimioterapia (P<0.05), o comprimento do cólon, o volume e a massa tumoral diminuíram (P<0.05), os níveis séricos de DAO e D-LA aumentaram (P<0.05), a expressão e translocação nuclear de NF-κB aumentaram (P<0.05), e a expressão da proteína AQP8 no tecido colônico diminuiu (P<0.05). Em comparação ao grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou escores DAI e níveis séricos de DAO e D-LA reduzidos (P<0.05), diminuição na expressão e translocação nuclear de NF-κB (P<0.05), e aumento na expressão da proteína AQP8 no tecido colônico (P<0.05). Os resultados da coloração HE mostraram que a estrutura do tecido colônico nos grupos normal e portador estava normal, enquanto o grupo quimioterapia apresentou lesões patológicas no tecido colônico, como destruição das criptas e infiltração celular inflamatória; em comparação ao grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura mostrou aumento no comprimento das vilosidades do cólon, melhora na organização celular e diminuição na infiltração inflamatória. Conclusão: A eletroacupuntura no ponto “Zusanli” pode inibir a ativação excessiva da via de sinalização NF-κB, aumentar a expressão da proteína AQP8, reduzir o dano à mucosa intestinal, diminuir a liberação de DAO e D-LA, mantendo assim a função da barreira intestinal.