A eletroacupuntura no ponto "Zusanli" alivia o dano da mucosa do cólon após quimioterapia com 5-FU em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal e seus efeitos sobre as proteínas NF-κB e AQP8

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura no ponto "Zusanli" sobre o dano da mucosa do cólon em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal após quimioterapia com 5-fluorouracil (5-FU), bem como sobre a expressão do fator nuclear κB (NF-κB) e da proteína aquaporina 8 (AQP8), e explorar seu possível mecanismo de ação. Método: foi estabelecido um modelo animal de tumor transplantado de câncer colorretal por injeção subcutânea da linhagem celular de câncer colorretal CT26 em camundongos BALB/c. Quando o tumor atingiu um volume de 100~300 mm3, os camundongos que apresentaram sucesso no modelo foram divididos aleatoriamente em grupo com tumor, grupo quimioterapia e grupo quimioterapia + eletroacupuntura, com 6 camundongos em cada grupo. Outros 6 camundongos BALB/c normais foram usados como grupo normal. Os grupos quimioterapia e quimioterapia + eletroacupuntura começaram no dia da separação a receber injeção intraperitoneal diária de solução de 5-FU (50 mg/kg, 0,01 mL/g), uma vez ao dia durante 5 dias; o grupo quimioterapia + eletroacupuntura recebeu imediatamente após a quimioterapia eletroacupuntura bilateral no ponto "Zusanli", onda contínua, frequência de 2 Hz, intensidade de 1~2 mA, 5 minutos por sessão, por 5 dias consecutivos. Durante o experimento, o índice de atividade da doença (DAI) dos camundongos foi avaliado diariamente; o volume tumoral foi medido uma vez ao dia, após a coleta foi medido o peso do tumor e o comprimento do cólon; a morfologia do tecido do cólon foi observada por coloração HE; o conteúdo sérico de diaminoxidase (DAO) e ácido D-lático (D-LA) foi detectado por ELISA; a expressão positiva de AQP8 no cólon foi detectada por imunohistoquímica; a translocação nuclear do NF-κB no cólon foi detectada por imunofluorescência; os níveis de expressão das proteínas NF-κB e AQP8 no cólon foram detectados por Western blot. Resultados: comparado ao grupo normal, não houve diferenças estatisticamente significativas nos diversos indicadores do grupo com tumor (volume e peso do tumor não foram comparados). Comparado ao grupo com tumor, o escore DAI do grupo quimioterapia aumentou (P<0,05), o comprimento do cólon, o volume tumoral e o peso do tumor diminuíram (P<0,05), os conteúdos séricos de DAO e D-LA aumentaram (P<0,05), a expressão de proteína NF-κB e a translocação nuclear aumentaram no cólon (P<0,05), enquanto o nível de expressão de proteína AQP8 nos tecidos do cólon diminuiu (P<0,05). Comparado ao grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou redução na pontuação DAI e nos níveis séricos de DAO e D-LA (P<0,05), redução na expressão da proteína NF-κB e sua translocação nuclear no cólon (P<0,05), bem como aumento na expressão proteica de AQP8 no tecido do cólon (P<0,05). Os resultados da coloração HE mostraram que a estrutura do tecido do cólon nos grupos normal e com tumor não apresentava anormalidades, enquanto o tecido do cólon dos camundongos quimioterapizados apresentou destruição das criptas, infiltração de células inflamatórias e outras lesões patológicas; comparado ao grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura exibiu aumento do comprimento dos vilos do cólon, melhoria na desordem do arranjo celular do tecido e redução da infiltração inflamatória. Conclusão: a eletroacupuntura no ponto "Zusanli" pode suprimir a ativação excessiva da via de sinalização NF-κB induzida pela quimioterapia com 5-FU em camundongos com tumor, aumentar a expressão da proteína AQP8, reduzir danos à mucosa intestinal, diminuir a liberação de DAO e D-LA, mantendo assim a função da barreira intestinal.

关键词

Eletroacupuntura; câncer colorretal transplantado; 5-fluorouracil; dano da mucosa intestinal; tecido do cólon; fator nuclear κB; aquaporina 8

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