Eletroacupuntura "Zusanli" alivia o dano à mucosa do cólon em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal após quimioterapia com 5-FU e seu efeito nas proteínas NF-κB e AQP8
O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura no ponto "Zusanli" sobre o dano à mucosa do cólon em camundongos com tumor transplantado de câncer colorretal após quimioterapia com 5-fluorouracil (5-FU), bem como seu efeito nas proteínas fator nuclear κB (NF-κB) e aquaporina 8 (AQP8), explorando possíveis mecanismos de ação. Camundongos BALB/c foram selecionados e receberam injeção subcutânea da linha celular CT26 de câncer colorretal para estabelecer um modelo animal de tumor transplantado. Quando o volume tumoral chegou a 100 a 300 mm³, os camundongos com tumor estabelecido com sucesso foram randomizados em grupo portador de tumor, grupo quimioterapia e grupo quimioterapia + eletroacupuntura, com 6 camundongos em cada. Outros 6 camundongos BALB/c normais foram usados como grupo normal. Os grupos de quimioterapia e quimioterapia + eletroacupuntura iniciaram no mesmo dia a injeção intraperitoneal de solução de 5-FU (50 mg/kg, 0,01 mL/g), uma vez ao dia por 5 dias; o grupo quimioterapia + eletroacupuntura recebeu eletroacupuntura bilateral no ponto "Zusanli" imediatamente após a quimioterapia, com onda contínua, frequência de 2 Hz, intensidade de 1-2 mA, por 5 minutos por sessão, durante 5 dias. Durante o experimento, o índice de atividade da doença (DAI) foi avaliado diariamente; durante a intervenção, o volume do tumor foi medido uma vez ao dia; após a coleta de amostras, a massa tumoral e o comprimento do cólon foram medidos; a morfologia do tecido do cólon foi observada por coloração HE; os níveis séricos de diaminooxidase (DAO) e ácido lático D (D-LA) foram detectados por ELISA; a expressão da proteína aquaporina 8 (AQP8) no cólon foi avaliada por imunohistoquímica; a translocação nuclear de NF-κB foi detectada por imunofluorescência; e os níveis de expressão das proteínas NF-κB e AQP8 foram detectados por Western blot. Em comparação com o grupo normal, não houve diferenças estatísticas significativas em nenhum dos indicadores no grupo portador de tumor. Em comparação com o grupo portador de tumor, a pontuação DAI aumentou no grupo quimioterapia (P<0,05), o comprimento do cólon, volume e massa tumoral diminuíram (P<0,05), os níveis séricos de DAO e D-LA aumentaram (P<0,05), a expressão e translocação nuclear de NF-κB aumentaram (P<0,05), e a expressão da proteína AQP8 no tecido do cólon diminuiu (P<0,05). Em comparação com o grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou diminuição da pontuação DAI, níveis séricos de DAO e D-LA (P<0,05), redução na expressão e translocação nuclear de NF-κB (P<0,05), e aumento na expressão da proteína AQP8 (P<0,05). Os resultados da coloração HE mostraram que não houve anormalidades na estrutura do tecido do cólon nos grupos normal e portador de tumor, enquanto o grupo quimioterapia apresentou lesões patológicas no tecido do cólon, como destruição das criptas e infiltração celular inflamatória. Em comparação com o grupo quimioterapia, o grupo quimioterapia + eletroacupuntura apresentou aumento no comprimento dos vilos colônicos, melhora na desorganização celular tecidual e diminuição da infiltração celular inflamatória. Conclusão: A eletroacupuntura no ponto "Zusanli" pode inibir a ativação excessiva da via de sinalização NF-κB, aumentar a expressão da proteína AQP8, reduzir o dano à mucosa intestinal, diminuir a liberação de DAO e D-LA, e assim manter a função de barreira intestinal.
关键词
eletroacupuntura;câncer colorretal transplantado;5-fluorouracil;dano à mucosa intestinal;tecido do cólon;fator nuclear κB;aquaporina 8