Estudo do mecanismo do efeito da sensibilização por eletroacupuntura no ponto Sanyinjiao baseado no canal iônico Piezo1 na melhoria da dismenorreia primária em ratos

WEI Yan-rong ,  

ZI Yan ,  

PENG Yu-ting ,  

ZHANG You ,  

ZHOU Jin ,  

TANG Yi-wen ,  

XUE Xiao ,  

YUE Zeng-hui ,  

摘要

O objetivo foi explorar os mecanismos do efeito da sensibilização por eletroacupuntura no ponto "Sanyinjiao" na melhoria da dismenorreia primária (PDM) em ratos, com foco no papel da proteína piezoelétrica 1 (Piezo1) no efeito da eletroacupuntura. Sessenta ratas fêmeas foram divididas aleatoriamente em grupo controle (10) e grupo modelo (50). O limiar de dor mecânica na área do ponto "Sanyinjiao" esquerdo foi avaliado com um algesímetro eletrônico von Frey. Com base na taxa de alteração do limiar de dor mecânica, os grupos de alta e baixa sensibilização do modelo, bem como os grupos de alta e baixa sensibilização por eletroacupuntura, foram selecionados, com 10 ratos em cada grupo. O modelo de PDM foi estabelecido por injeção conjunta de ácido benzoico estradiol e ocitocina. Os dois grupos de eletroacupuntura receberam intervenção no ponto "Sanyinjiao" com 50 Hz, ondas densas, 20 minutos por dia, durante 5 dias consecutivos. Foi registrado o número de respostas de torção para avaliar a intensidade da dor abdominal; foi utilizada a imagem por dispersão a laser para observar o fluxo sanguíneo uterino; a coloração HE para observar a morfologia histopatológica do tecido uterino; a coloração com azul de toluidina para observar a taxa de desgranulação de mastócitos na área do ponto "Sanyinjiao"; a microscopia eletrônica de transmissão para observar a ultraestrutura celular uterina; o método ELISA para medir os níveis de prostaglandina E₂ (PGE₂), prostaglandina F₂α (PGF₂α) e fator de necrose tumoral-α (TNF-α) no soro e no homogêneo uterino; o método Western blot para detectar a expressão das proteínas Piezo1, peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), tripsina (Tryptase) e Piezo1 uterina na área do ponto "Sanyinjiao"; a imunofluorescência para detectar a expressão de CGRP e Tryptase na área do ponto "Sanyinjiao"; a qPCR para medir a expressão de mRNA de Piezo1 e ciclooxigenase-2 (COX-2) uterinos. Em comparação com o grupo controle, os grupos modelo de alta e baixa sensibilização apresentaram aumento no número e pontuação de torções (P <0,01), aparecimento do período latente da torção (P <0,01), redução no fluxo sanguíneo uterino (P <0,01), aumento na pontuação patológica uterina (P <0,01), aumento na taxa de desgranulação de mastócitos (P <0,01), aumento significativo nos níveis séricos e uterinos de PGF₂α, TNF-α e na relação PGF₂α/PGE₂ (P <0,01), redução significativa no conteúdo de PGE₂ (P <0,01), aumento de células positivas para CGRP e Tryptase e na expressão proteica de Piezo1, CGRP e Tryptase, aumento na expressão de mRNA de Piezo1 e COX-2 e na expressão proteica de Piezo1 uterina (P <0,01), e alterações na ultraestrutura do tecido uterino; em comparação com os grupos modelo de alta e baixa sensibilização, os grupos de eletroacupuntura apresentaram prolongamento do período latente da torção e reversão dos demais indicadores (P <0,01, P <0,05); em comparação com o grupo de baixa sensibilização de eletroacupuntura, o grupo de alta sensibilização apresentou efeito de melhora mais significativo (P <0,01). Conclusão: A sensibilização por eletroacupuntura no ponto "Sanyinjiao" em diferentes estados de sensibilização pode aliviar efetivamente a dor de ratos com PDM, sendo que o grupo de alta sensibilização por eletroacupuntura apresentou efeito melhor; o mecanismo depende do estado de sensibilização do ponto e pode envolver a regulação da expressão de Piezo1 na área do ponto, inibindo a desgranulação de mastócitos e a resposta inflamatória neurogênica, bem como a redução da expressão das proteínas da via Piezo1/COX-2/PGs no útero, inibindo a liberação de fatores inflamatórios, desempenhando assim efeito analgésico.

关键词

eletroacupuntura; dismenorreia primária; sensibilização do ponto de acupuntura; Sanyinjiao; proteína Piezo1

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