Estudo do mecanismo de efeito da acupuntura elétrica sensibilizadora no "Sanyinjiao" para melhorar a dismenorreia primária em ratos baseado no canal iônico Piezo1
Objetivo: explorar o mecanismo do efeito da acupuntura elétrica sensibilizadora no "Sanyinjiao" para melhorar a dismenorreia primária (DMP), enfatizando o papel da proteína Piezo1 no efeito da acupuntura elétrica. Métodos: 60 ratas fêmeas foram divididas aleatoriamente em grupo branco (10) e grupo modelo (50). O limiar de dor mecânica na área do acuponto "Sanyinjiao" esquerdo foi medido com o dispositivo eletrônico von Frey. De acordo com a taxa de variação do limiar de dor, foram selecionados grupos de alta e baixa sensibilização do modelo e da acupuntura elétrica, com 10 ratos cada. O modelo de DMP foi preparado mediante injeção combinada de benzoato de estradiol e ocitocina. Os dois grupos de acupuntura elétrica receberam intervenção de acupuntura elétrica no "Sanyinjiao", 50 Hz, onda contínua, 20 min/dia, durante 5 dias consecutivos. A resposta de torção foi registrada para avaliar o grau de dor; a imagem de espalhamento a laser foi usada para observar o fluxo sanguíneo uterino; coloração HE foi utilizada para observar a morfologia patológica do tecido uterino; coloração com azul de toluidina para observar a taxa de degranulação dos mastócitos na área do "Sanyinjiao"; microscopia eletrônica de transmissão para observar a ultraestrutura celular uterina; ELISA para medir PGE₂, PGF₂α e TNF-α no soro e no homogenato uterino; Western blot para detectar a expressão das proteínas Piezo1, CGRP, tripsina na área do "Sanyinjiao" e no útero; imunofluorescência para detectar a expressão de CGRP e tripsina na área do "Sanyinjiao"; qPCR para medir a expressão do mRNA de Piezo1 e COX-2 no útero. Resultados: comparado ao grupo branco, os grupos de alta e baixa sensibilização do modelo apresentaram aumento no número de torções, pontuação de torção (P<0,01), aparecimento do período latente da torção (P<0,01), redução do fluxo sanguíneo uterino (P<0,01), aumento da pontuação patológica uterina (P<0,01), aumento da taxa de degranulação dos mastócitos (P<0,01), aumento significativo do conteúdo de PGF2α no soro e útero, TNF-α sérico e razão PGF2α/PGE2 (P<0,01), redução significativa do conteúdo de PGE2 no soro e útero (P<0,01), aumento da expressão de proteínas Piezo1, CGRP, tripsina, aumento da expressão de mRNA de Piezo1 e COX-2 e alterações ultraestruturais no tecido uterino (P<0,01). A comparação entre os grupos de acupuntura elétrica e os grupos modelo de alta e baixa sensibilização mostrou reversão dos indicadores acima (P<0,01, P<0,05); o grupo de alta sensibilização da acupuntura elétrica apresentou um efeito mais evidente que o grupo de baixa sensibilização (P<0,01). Conclusão: a acupuntura elétrica em diferentes estados de sensibilização no ponto "Sanyinjiao" pode aliviar efetivamente a dor da DMP em ratos, sendo mais eficaz no grupo de alta sensibilização. O mecanismo depende do estado de sensibilização do ponto, possivelmente regulando a expressão de Piezo1 na área do ponto, inibindo a degranulação de mastócitos e a resposta inflamatória neurogênica, e regulando negativamente a expressão das proteínas da via Piezo1/COX-2/PGs no útero, inibindo a liberação de fatores inflamatórios para exercer efeito analgésico. 【Palavras-chave】 Acupuntura elétrica; "Sanyinjiao"; dismenorreia primária; Piezo1; sensibilização do ponto de acupuntura
关键词
Acupuntura elétrica; Sanyinjiao (SP6); dismenorreia primária; Piezo1; sensibilização do ponto de acupuntura