Mecanismo pelo qual a eletroacupuntura "Tiao Shen Tong Luo" regula a polarização microglial em ratos com lesão cerebral por isquemia-reperfusão e transtornos de aprendizagem e memória através da via Nrf2/TREM2

SHI Rong ,  

MA Tie-ming ,  

SUN Shi-jing ,  

JIANG Jing ,  

LI Jia-xin ,  

WU Qiong ,  

ZHOU Zi-xi ,  

ZHANG Jia-wei ,  

YANG Rui-rui ,  

ZHAO Xi-tong ,  

MA Jun-jie ,  

ZHANG Xiao-qing ,  

CHEN Yi-ran ,  

摘要

Objetivo: explorar o efeito da eletroacupuntura "Tiao Shen Tong Luo" na via de sinalização do fator nuclear eritroide 2 relacionado (Nrf2)/receptor 2 ativador de células mieloides (TREM2) no hipocampo de ratos com oclusão/reperfusão da artéria cerebral média (MCAO/R) com distúrbios de aprendizagem e memória, assim como seu efeito regulador na polarização das células microgliais no hipocampo. Métodos: ratas SD foram randomizadas em grupo de cirurgia simulada de 7 dias (10 ratos), grupo de cirurgia simulada de 14 dias (10 ratos) e grupo modelo. O modelo MCAO/R foi estabelecido seguindo o método de Koizumi, e ratos com distúrbios de aprendizagem e memória selecionados pelo teste do labirinto aquático de Morris. Os ratos modelados com sucesso foram randomizados em grupo modelo de 7 dias, grupo de eletroacupuntura de 7 dias, grupo modelo de 14 dias e grupo de eletroacupuntura de 14 dias, com 10 ratos por grupo. Os grupos de eletroacupuntura receberam tratamento "Tiao Shen Tong Luo" por 10 minutos por sessão, uma vez ao dia, durante 7 ou 14 dias consecutivos. A função neurológica foi avaliada pelo escore modificado de déficits neurológicos (mNSS). A capacidade de aprendizagem e memória foi testada pelo labirinto aquático de Morris. A morfologia histopatológica da região CA1 do hipocampo foi observada pela coloração HE, morfologia neuronal e corpúsculos de Nissl pela coloração de Nissl, e a quantidade de células positivas CD68/Iba1 e CD206/Iba1 observadas por dupla coloração imunofluorescente. A expressão relativa das proteínas Nrf2, TREM2, DAP12, TNF-α e TGF-β no hipocampo foi detectada por Western blot. Resultados: em comparação com o grupo de cirurgia simulada no mesmo tempo, os grupos modelo de 7 e 14 dias mostraram aumento do mNSS (P<0.01), arranjo frouxo de neurônios na região CA1 do hipocampo, redução dos corpúsculos de Nissl e diminuição da expressão das proteínas Nrf2, TREM2 e DAP12 (P分别小于0.05和0.01). O grupo modelo de 14 dias apresentou prolongamento do tempo de fuga (P<0.01), redução no número de travessias da plataforma original e tempo de permanência no quadrante alvo (P<0.01), aumento na contagem de células positivas M1 CD68+/Iba1+ na região CA1 do hipocampo (P<0.05) e aumento da expressão proteica de TNF-α (P<0.01). Em comparação com os grupos modelo no mesmo tempo, os grupos de eletroacupuntura de 7 e 14 dias mostraram redução do mNSS (P<0.01), melhoria no espaçamento dos neurônios na região CA1, aumento dos corpúsculos de Nissl, redução da expressão proteica de TNF-α (P分别小于0.05和0.01) e aumento da expressão de Nrf2 e TREM2 (P分别小于0.05和0.01). No grupo de eletroacupuntura de 14 dias, o tempo de fuga foi encurtado (P<0.01), aumentaram as vezes que cruzaram a plataforma original e o tempo no quadrante alvo (P分别小于0.05和0.01), diminuiu a contagem de células positivas M1 CD68+/Iba1+ (P<0.01), aumentaram as células positivas M2 CD206+/Iba1+ e a expressão proteica de DAP12 e TGF-β (P分别小于0.01和0.05). Em comparação com o grupo de eletroacupuntura de 7 dias, o mNSS diminuiu no grupo de 14 dias (P<0.05), os neurônios na região CA1 estavam densamente arranjados, com morfologia próxima do normal, e a expressão proteica de TREM2 aumentou (P<0.05). Conclusão: a eletroacupuntura "Tiao Shen Tong Luo" pode melhorar a função de aprendizagem e memória em ratos MCAO/R, possivelmente relacionada à ativação da via de sinalização Nrf2/TREM2 no hipocampo, à inibição da polarização microglial para o tipo M1 e à promoção para o tipo M2, sendo o efeito da intervenção de 14 dias mais evidente.

关键词

Lesão cerebral por isquemia-reperfusão; transtornos de aprendizagem e memória; eletroacupuntura "Tiao Shen Tong Luo"; polarização microglial; via de sinalização Nrf2/TREM2

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