Estudo do mecanismo de ação da agulha-faca na inibição da morte ferroptótica das células do cartilagem baseada no eixo de sinalização Piezo1/GPX4/ACSL4

ZHANG Liang-zhi ,  

LIU Hong ,  

HUANG Wang-xiang ,  

LIU Wen-hui ,  

YU Wen-ying ,  

XIE Li-mei ,  

ZHENG Yu-kui ,  

ZENG Wei-yi ,  

XIU Zhong-biao ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da agulha-faca no eixo de sinalização do canal iônico mecanicamente controlado por piezoelétrico 1 (Piezo1)/glutationa peroxidase 4 (GPX4)/síntese de Acil-CoA de cadeia longa 4 (ACSL4) nas células de cartilagem da articulação do joelho de coelhos com osteoartrite do joelho (KOA), e explorar o mecanismo de ação da agulha-faca no tratamento do KOA. Métodos: 24 coelhos machos da Nova Zelândia foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo e grupo de agulha-faca, com 8 coelhos em cada grupo. O modelo de KOA foi estabelecido fixando a perna posterior esquerda em extensão por 6 semanas pelo método Videman modificado. No grupo agulha-faca, foram selecionados os pontos de lesão da linha meridiana do joelho esquerdo “Pico do Grou”, “Supra lateral da patela”, “Supra medial da patela”, “Entre o perônio”, “Wei Yang” e “Yin Ling”, realizando o tratamento com agulha-faca uma vez por semana por 4 semanas consecutivas. Antes e após a intervenção foi avaliado o índice de disfunção de Lequesne MG do joelho esquerdo; observadas alterações patológicas nas células da cartilagem do joelho esquerdo por coloração HE; observada a ultraestrutura mitocondrial das células da cartilagem do joelho esquerdo por microscopia eletrônica de transmissão; detectados os níveis de expressão de mRNA de Piezo1, GPX4 e ACSL4 no tecido da cartilagem do joelho esquerdo por PCR quantitativo em tempo real; detectada a expressão das proteínas Piezo1, GPX4 e ACSL4 por Western blot. Resultados: Em comparação com o grupo controle, o grupo modelo apresentou aumento na pontuação Lequesne MG do joelho esquerdo (P<0.01), aumento nos níveis de expressão de mRNA e proteína de Piezo1 e ACSL4 (P<0.01), e redução nos níveis de expressão de mRNA e proteína GPX4 (P<0.01, P<0.05). Em comparação com o grupo modelo, o grupo agulha-faca mostrou redução na pontuação Lequesne MG do joelho esquerdo (P<0.05), redução na expressão de mRNA e proteína de Piezo1 e ACSL4 (P<0.01, P<0.05), e aumento na expressão de mRNA e proteína de GPX4 (P<0.01, P<0.05). A coloração HE mostrou que a superfície da cartilagem no grupo modelo era áspera, com núcleos celulares contraídos, rompidos ou ausentes, quantidade reduzida de células, arranjo disperso e estratificação irregular; no grupo agulha-faca, a superfície da cartilagem era relativamente suave, os núcleos celulares eram mais claros, a quantidade de células aumentada, o arranjo mais ordenado e a estratificação mais uniforme. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou que, no grupo modelo, as células da cartilagem estavam contraídas e de forma irregular, a membrana celular estava rompida, o citoplasma apresentava dissolução em muitos locais e formação de vacúolos, as mitocôndrias eram redondas ou ovais, em quantidade reduzida, a matriz parcialmente dissolvida em ampla área, as cristas mitocondriais encurtadas ou até rompidas e ausentes; no grupo agulha-faca, as células da cartilagem tinham forma relativamente regular, membrana celular relativamente intacta, citoplasma relativamente homogêneo, mitocôndrias redondas ou ovais em quantidade maior, matriz relativamente homogênea e com mais cristas. Conclusão: Com base na teoria dos meridianos, o relaxamento dos pontos lesados da linha meridiana ao redor do joelho com agulha-faca pode regular o eixo de sinalização Piezo1/GPX4/ACSL4, inibir a morte ferroptótica das células do cartilagem e melhorar o dano do cartilagem em coelhos KOA.

关键词

osteoartrite do joelho; agulha-faca; morte ferroptótica; eixo de sinalização Piezo1/GPX4/ACSL4

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