Estudo do mecanismo pelo qual a eletroacupuntura melhora a dor em ratos com espondilopatia cervical radicular regulando a via de sinalização NO/cGMP/PKG via proteína Piezo1
O objetivo é investigar o efeito regulatório da eletroacupuntura na proteína Piezo1 em ratos com espondilopatia cervical radicular (CSR) e sua influência na via de sinalização do óxido nítrico (NO)/monofosfato cíclico de guanosina (cGMP)/proteína quinase G (PKG), explorando o mecanismo analgésico do tratamento com eletroacupuntura para CSR. Métodos: Ratos machos SD foram divididos aleatoriamente em grupo placebo, grupo modelo, grupo eletroacupuntura e grupo eletroacupuntura + Yoda1, com 10 ratos em cada grupo. O modelo CSR foi estabelecido pelo método de inserção de fio no canal vertebral nos grupos modelo, eletroacupuntura e eletroacupuntura + Yoda1. O grupo eletroacupuntura recebeu tratamento bilateral nos pontos “Hegu” e “Taichong” com eletroacupuntura, 20 minutos por sessão, durante 7 dias consecutivos; o grupo eletroacupuntura + Yoda1 recebeu injeção intraperitoneal do agonista Piezo1 Yoda1 (1,5 mg/kg) antes do tratamento. Foram avaliadas as pontuações da marcha, o limiar de retirada mecânica e a latência de retirada térmica antes e após a intervenção; as alterações patológicas no tecido da medula espinhal foram observadas por coloração HE; a expressão do gene Piezo1 no tecido medular foi detectada por qPCR; a expressão de Piezo1 e calmodulina (CaM) foi detectada por dupla coloração imunofluorescente; a expressão das proteínas CaM, nNOS, sGC e PKG1 foi avaliada por Western blot; o teor de cGMP foi medido por ELISA; e o teor de NO por método colorimétrico de nitrito. Resultados: Em comparação com o grupo placebo, a pontuação da marcha no grupo modelo aumentou antes da intervenção (P<0,01), com diminuição do limiar de retirada mecânica e encurtamento da latência de retirada térmica (P<0,01); a expressão do mRNA de Piezo1, a intensidade da fluorescência imunológica de Piezo1 e CaM, a expressão relativa das proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 e os níveis de cGMP e NO aumentaram significativamente (P<0,01); a coloração HE mostrou retração neuronal, escurecimento da coloração celular, indistinção entre núcleo e citoplasma, proliferação de células gliais, aumento da densidade celular, dilatação e hemorragia de microvasos no grupo modelo. Em comparação com o grupo modelo, o grupo eletroacupuntura apresentou pontuação de marcha reduzida (P<0,01), aumento do limiar de retirada mecânica e prolongamento da latência de retirada térmica (P<0,01); a expressão do mRNA de Piezo1, a intensidade da fluorescência imunológica de Piezo1 e CaM, a expressão relativa das proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 e os níveis de cGMP e NO foram reduzidos (P<0,01); a coloração HE mostrou retração neuronal leve, menor dilatação microvascular e menor proliferação de células gliais no grupo eletroacupuntura em comparação com o grupo modelo. Em comparação com o grupo eletroacupuntura, o grupo eletroacupuntura + Yoda1 apresentou encurtamento da latência de retirada térmica (P<0,01), aumento da expressão do mRNA de Piezo1, da intensidade da fluorescência imunológica de Piezo1 e CaM, expressão relativa das proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 e níveis de cGMP e NO (P<0,05, P<0,01); a coloração HE mostrou retração neuronal, aumento do número de células gliais e dilatação parcial e hemorragia de microvasos. Conclusão: A eletroacupuntura pode aliviar efetivamente a dor em ratos com CSR, provavelmente por inibir a ativação da proteína Piezo1 na medula espinhal e suprimir a via de sinalização NO/cGMP/PKG, exercendo assim efeito analgésico.