Mecanismo do efeito da acupuntura nos pontos 'Houxi' e 'Huantiao' na regulação da via de sinalização PI3K/AKT/mTOR e autofagia das células do núcleo pulposo no modelo de degeneração do disco lombar em ratos

HU Zhi-xiang ,  

WU Han ,  

LÜ Heng ,  

ZHANG Hao ,  

ZHAI Chun-tao ,  

LI Sheng-yun ,  

WANG Zheng-hao ,  

LÜ Yu-e ,  

摘要

Objetivo observar o efeito da acupuntura nos pontos 'Houxi' e 'Huantiao' na via de sinalização da fosfatidilinositol-3 quinase (PI3K)/proteína quinase B (AKT)/proteína alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) e na autofagia das células do núcleo pulposo em modelo de rato com degeneração do disco intervertebral lombar (IDD), explorando seu possível mecanismo para retardar a progressão da IDD. Métodos: foram selecionados 36 ratos SD, divididos aleatoriamente em grupo de cirurgia simulada, grupo modelo e grupo de acupuntura, com 12 ratos em cada grupo. Os grupos modelo e acupuntura desenvolveram o modelo de IDD por punção do anel fibroso. Após o sucesso da modelagem, o grupo de acupuntura recebeu tratamento de acupuntura nos pontos 'Houxi' e 'Huantiao' por 20 minutos por sessão, uma vez por dia durante 14 dias. O limiar do reflexo de retirada mecânica do pé direito foi medido usando filamentos de VonFrey antes e após a modelagem e nos dias 7 e 14 após a intervenção; também foi medida a latência do reflexo de retirada induzido por estímulo térmico; as características morfológicas do tecido do disco intervertebral foram observadas pela coloração HE; os níveis de agrecano, colágeno tipo II, fator de transcrição SOX9, metaloproteinases MMP3 e MMP13 foram determinados no tecido do núcleo pulposo por ELISA; a expressão de mRNA de SOX9 e MMP13 foi detectada por PCR quantitativo em tempo real; a expressão positiva de LC3 foi observada por imunofluorescência; e as proteínas associadas à via PI3K/AKT/mTOR, LC3-II, Beclin1 e p62 foram analisadas por Western blot. Resultados: em comparação com o grupo cirurgia simulada, o grupo modelo apresentou diminuição no limiar do reflexo mecânico e latência do reflexo térmico nos dias 7 e 14 (P0.001), redução dos níveis de agrecano, colágeno II, SOX9 e expressão de mRNA de SOX9 (P0.001, P0.01), aumento dos níveis de MMP3, MMP13 e expressão de mRNA de MMP13, maior expressão positiva de LC3 e níveis elevados de Beclin1 e LC3-II (P0.001), além de diminuição das razões fosforiladas p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR e expressão de proteína p62 (P0.001). Em comparação com o grupo modelo, o grupo de acupuntura apresentou aumento no limiar do reflexo mecânico e na latência do reflexo térmico (P0.001), aumento nos níveis de agrecano, colágeno II, SOX9 e expressão de mRNA de SOX9 (P0.001), diminuição dos níveis de MMP3, MMP13, expressão de mRNA de MMP13, expressão positiva de LC3 e níveis de Beclin1 e LC3-II (P0.001, P0.01, P0.05), e aumento das razões p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR e expressão de p62 (P0.01, P0.05, P0.001). A coloração HE mostrou que o grupo modelo apresentava menor número de células do núcleo pulposo com morfologia desordenada e muitas vacúolos, enquanto o grupo de acupuntura mostrava células mais organizadas, com morfologia normal e menor número de vacúolos. Conclusão: a acupuntura nos pontos 'Houxi' e 'Huantiao' pode retardar a progressão da IDD regulando a autofagia das células do núcleo pulposo do disco lombar e reduzindo o grau de degradação da matriz extracelular, sendo seu mecanismo potencial provavelmente estreitamente relacionado à ativação da via PI3K/Akt/mTOR mediada pela acupuntura nesses pontos.

关键词

acupuntura;Houxi;Huantiao;degeneração do disco lombar;via de sinalização PI3K/Akt/mTOR;autofagia

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website