Estudo do mecanismo da eletroacupuntura nos pontos "Yingxiang-Hegu" para a regulação de ILC2s via via IL-33/ST2 para melhorar a rinite alérgica em ratos

Wu Han ,  

Lü Heng ,  

Zhang Hao ,  

Hu Zhixiang ,  

Li Lei ,  

Zhai Chuntao ,  

Lü Yu’e ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito regulador da eletroacupuntura nos pontos "Yingxiang-Hegu" na via de sinalização da interleucina (IL)-33/proteína de expressão gênica de estímulo ao crescimento 2 (ST2) e nas células linfoides inatas do grupo 2 (ILC2s) na mucosa nasal de ratos com rinite alérgica (RA), e explorar seu mecanismo terapêutico. Métodos: Ratos SD foram aleatoriamente divididos em grupo controle (12) e grupo modelo (36). O modelo de RA foi estabelecido por sensibilização com ovalbumina (OVA). Os 36 ratos com modelo bem sucedido foram aleatoriamente divididos em grupo modelo (12), grupo de medicamento ocidental (12) e grupo de eletroacupuntura (12). O grupo de eletroacupuntura recebeu punção nos pontos "Yingxiang-Hegu", com o aparelho de eletroacupuntura conectado aos pontos homolaterais "Yingxiang" e "Hegu", com ondas irregulares, frequência de 2 Hz/100 Hz, intensidade de corrente de 1~2 mA, e agulha mantida por 20 minutos; o grupo de medicamento ocidental recebeu clorfeniramina por gavagem a 0,1 mg/100 g. Cada grupo foi tratado uma vez ao dia durante 14 dias consecutivos. Os sintomas alérgicos nasais (coçar o nariz, espirros, coriza) foram observados e pontuados antes, após o modelo e após a intervenção. Após a intervenção, coloração HE foi feita para observar alterações patológicas na mucosa nasal; ELISA para medir imunoglobulina E específica para ovalbumina (OVA-sIgE), IL-9 e IL-13 no soro; coloração dupla por imunofluorescência para detectar expressão positiva de ST2, antígeno tímico 1 (Thy1 ou CD90) e número de ILC2s na mucosa nasal; PCR quantitativo em tempo real para mensurar níveis de mRNA de GATA3, ROR-α, IL-33, ST2, IL-1RAcP, MyD88, IRAK4 e NF-κB p65; Western blot para detectar níveis das proteínas IL-33, ST2 e MyD88 na mucosa nasal. Resultados: Após sensibilização com OVA, comparado ao grupo controle, o grupo modelo mostrou escores significativamente elevados dos sintomas alérgicos nasais (>5 pontos, P<0,001), indicando sucesso do modelo. Após intervenção, comparado ao grupo controle, o escore de sintomas alérgicos nasais no grupo modelo permaneceu alto (P <0,001); coloração HE mostrou dano da barreira mucosa e resposta inflamatória significativa; níveis séricos de OVA-sIgE, IL-9 e IL-13 aumentaram significativamente (P<0,001); número de ILC2s na mucosa nasal aumentou (P <0,001), intensidade de fluorescência de ST2 e Thy1 também aumentou (P <0,001); níveis de mRNA de GATA3, ROR-α, IL-33, ST2, IL-1RAcP, MyD88, IRAK4 e NF-κB p65 aumentaram (P <0,001, P <0,01); níveis de proteínas IL-33, ST2 e MyD88 aumentaram (P <0,001). Comparado ao grupo modelo, os grupos de eletroacupuntura e medicamento ocidental demonstraram redução na pontuação de sintomas (P <0,001); coloração HE apresentou redução da infiltração inflamatória e melhora na integridade do tecido; níveis séricos de OVA-sIgE, IL-9 e IL-13 diminuíram (P <0,01, P <0,001); número de ILC2s diminuiu (P <0,001); intensidade de fluorescência de ST2 e Thy1 diminuiu (P <0,001, P <0,01); níveis de mRNA de GATA3, ROR-α, IL-33, ST2, IL-1RAcP, MyD88, IRAK4 e NF-κB p65 diminuíram significativamente (P <0,001, P <0,01, P <0,05); níveis protéicos de IL-33, ST2 e MyD88 diminuíram significativamente (P <0,01, P <0,001, P <0,05). Não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos de eletroacupuntura e medicamento ocidental em todos os índices. Conclusão: A eletroacupuntura nos pontos "Yingxiang-Hegu" pode melhorar as alterações inflamatórias da mucosa nasal induzidas por OVA em ratos com RA, possivelmente através da inibição da via de sinalização IL-33/ST2 da mucosa nasal e da redução da expressão de ILC2s.

关键词

rinite alérgica; eletroacupuntura; pontos de acupuntura; Yingxiang-Hegu; IL-33/ST2; ILC2s

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