O objetivo é esclarecer o efeito de segurança da trombólise tardia promovida pela acupuntura em modelos de rato com acidente vascular cerebral isquêmico, revelando o mecanismo pelo qual a acupuntura melhora a segurança da trombólise ao inibir a via de sinalização das quinases de interação do receptor 1 (RIPK1)/quinase de interação do receptor 3 (RIPK3)/proteína semelhante à quinase de substrato misto (MLKL) que mediam a necroptose programada. Métodos: Foram selecionados aleatoriamente 33 ratos SD como grupo de cirurgia simulada, e 99 ratos SD com modelagem bem-sucedida foram divididos por tabela de números aleatórios em grupo modelo, grupo trombólise às 6 h e grupo acupuntura + trombólise às 6 h, com 33 ratos em cada grupo. Exceto pelo grupo de cirurgia simulada, os demais ratos foram submetidos a modelo de acidente vascular cerebral isquêmico por método de embolização com trombo autólogo. O grupo trombólise às 6 h recebeu tratamento trombolítico intravenoso com ativador tecidual recombinante do plasminogênio 6 h após a modelagem; o grupo acupuntura + trombólise às 6 h recebeu acupuntura simultaneamente com a trombólise nos pontos bilaterais "Neiguan" e "Shuigou", com retenção de agulha por 20 minutos. A pontuação de Bederson foi usada para avaliar a função neurológica dos ratos; a coloração por cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio foi utilizada para observar o volume do infarto cerebral; a permeabilidade da barreira hematoencefálica (BHE) foi detectada pelo método do azul de Evans; o conteúdo hídrico cerebral foi medido pelo método de volume específico; a concentração de hemoglobina no tecido cerebral isquêmico foi determinada por espectrofotometria; a expressão das proteínas RIPK1, RIPK3 e p-MLKL na penumbra isquêmica foi detectada por Western blot; a expressão do mRNA de RIPK1, RIPK3 e MLKL foi medida por PCR quantitativo em tempo real; e a colocalização de p-MLKL com células endoteliais foi detectada por imunofluorescência dupla. Resultados: O fluxo sanguíneo dos ratos diminuiu significativamente após a modelagem, e a pontuação neurológica aumentou 2 horas após a modelagem (P<0.01). Após 24 horas, em comparação com o grupo de cirurgia simulada, o grupo modelo apresentou aumento na pontuação neurológica, porcentagem do volume do infarto cerebral e permeabilidade da BHE (P<0.01); aumento nos níveis de proteína RIPK1 (P<0.05), e expressão de mRNA de RIPK1, RIPK3 e MLKL (P<0.01, P<0.05); aumento no percentual de células positivas para colocalização de p-MLKL com células endoteliais (P<0.01). Comparado ao grupo modelo, o grupo trombólise às 6 h apresentou aumento adicional na permeabilidade da BHE, conteúdo hídrico cerebral e concentração de hemoglobina cerebral (P<0.01, P<0.05); níveis aumentados das proteínas RIPK3 e p-MLKL (P<0.05), expressão de mRNA de RIPK3 e MLKL (P<0.05); aumento no percentual de células positivas para colocalização de p-MLKL/células endoteliais (P<0.01). Comparado ao grupo modelo, o grupo acupuntura + trombólise às 6 h apresentou redução na pontuação neurológica, porcentagem do volume do infarto cerebral, permeabilidade da BHE e conteúdo hídrico cerebral (P<0.01, P<0.05); níveis reduzidos de proteína e mRNA de RIPK1 (P<0.05); percentual reduzido de células positivas para colocalização de p-MLKL com células endoteliais (P<0.05). Comparado ao grupo trombólise às 6 h, o grupo acupuntura + trombólise apresentou redução na pontuação neurológica, volume do infarto, permeabilidade da BHE, conteúdo hídrico cerebral e concentração de hemoglobina (P<0.01); diminuição da expressão das proteínas RIPK1, RIPK3 e p-MLKL (P<0.05, P<0.01), expressão de mRNA de RIPK1, RIPK3 e MLKL (P<0.01, P<0.05); percentual reduzido de células positivas para colocalização de p-MLKL e células endoteliais (P<0.01). Conclusão: A intervenção oportuna com acupuntura pode melhorar a função neurológica após trombólise em ratos com acidente vascular cerebral isquêmico, diminuir o volume do infarto cerebral, reduzir a permeabilidade da BHE, diminuir a ocorrência de complicações da trombólise e, assim, melhorar a segurança da trombólise; o mecanismo pode estar relacionado à inibição pela acupuntura da necroptose programada das células endoteliais mediada pela via de sinalização RIPK1/RIPK3/MLKL.

acupuntura; acidente vascular cerebral isquêmico; necroptose programada; segurança da trombólise