Objetivo: observar o efeito do método de acupuntura "Despertar o Cérebro e Abrir os Orifícios" sobre a via de sinalização do fator de troca de nucleotídeo de guanosina 1 (Epac1)/proteína relacionada ao sarcoma de rato 1 (Rap1) na zona da penumbra isquêmica (IP) do córtex cerebral de ratos submetidos ao modelo de oclusão/reperfusão da artéria cerebral média (MCAO/R), e explorar os caminhos moleculares através dos quais esse método, ao reparar a barreira hematoencefálica (BBB), alivia a lesão cerebral por isquemia/reperfusão (CIRI). Foram divididos aleatoriamente 84 ratos SD machos em quatro grupos: grupo simulação (sham), grupo modelo, grupo acupuntura e grupo acupuntura + ESI-09 (inibidor de Epac1), com 21 ratos por grupo. Exceto pelo grupo simulação, os demais grupos foram submetidos ao modelo de MCAO/R direito por meio do método modificado de Longa. O grupo acupuntura recebeu o método "Despertar o Cérebro e Abrir os Orifícios" nos pontos "Shuigou" e "Neiguan" bilateralmente; o grupo acupuntura + ESI-09 recebeu injeção intraperitoneal de ESI-09 (10 mg/kg) após a reperfusão e a mesma acupuntura. O fluxo sanguíneo cerebral foi monitorado por imagem de fluxo de laser speckle (antes da isquemia, 2 h de isquemia, 2 h pós-reperfusão); a função neurológica foi avaliada pelo escore modificado de Bederson (24 h pós-reperfusão); o volume da porcentagem de infarto cerebral foi medido pela coloração TTC; o teor de água no cérebro direito foi medido pelo método peso úmido/seco; a permeabilidade da BBB no córtex direito foi avaliada pela coloração Evans Blue (EB); a expressão de proteínas e mRNA de Epac1 e Rap1 na zona IP do córtex direito foi detectada por Western blot e PCR quantitativo em tempo real; a colocalização imunofluorescente da F-actina e da molécula de adesão plaquetária do endotélio (CD31, marcador endotelial) foi avaliada na zona IP; a ultraestrutura da BBB foi observada por microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram que, exceto no grupo simulação, o fluxo sanguíneo cerebral caiu para menos de 70% da linha de base após a isquemia e recuperou-se para mais de 70% após 2 h de reperfusão, confirmando o sucesso do modelo. Após 24 h da reperfusão, em comparação com o grupo simulação, o grupo modelo apresentou aumento nos escores neurológicos, porcentagem do volume do infarto, teor de água cerebral e teor de EB (P<0,01); diminuição da expressão proteica e de mRNA de Epac1 e Rap1 na zona IP (P<0,05, P<0,01); aumento da colocalização de F-actina/CD31 (P<0,01); membrana basal da BBB turva, descontínua, com dissolução parcial ou ausência das junções apertadas (TJ). Comparado ao grupo modelo, o grupo acupuntura apresentou melhora nos índices de lesão (P<0,01); aumento da expressão proteica e de mRNA de Epac1 e Rap1 (P<0,01); diminuição da colocalização de F-actina/CD31 (P<0,01); membrana basal contínua e estrutura TJ densa. Comparado ao grupo acupuntura, o grupo acupuntura + ESI-09 apresentou regressão dos índices de lesão (P<0,01); diminuição da expressão proteica e mRNA de Epac1 e Rap1 (P<0,01); aumento da colocalização de F-actina/CD31 (P<0,01); membrana basal da BBB ainda turva e dissolução na área TJ. Conclusão: o método de acupuntura "Despertar o Cérebro e Abrir os Orifícios" regula a via Epac1/Rap1 na zona IP do córtex cerebral, induz o rearranjo do citoesqueleto endotelial e alivia os danos da BBB após CIRI.

Acupuntura;via de sinalização Epac1/Rap1;barreira hematoencefálica;lesão cerebral por isquemia/reperfusão;rearranjo do citoesqueleto endotelial