Eletroacupuntura "Jiajie" melhora a disfunção dos membros em camundongos com esclerose lateral amiotrófica regulando a ativação do inflamasoma NLRP3

WANG Shi-lin ,  

HE Long ,  

YANG Jing ,  

ZHANG Na ,  

SUN Yuan-zheng ,  

LIU Guan-ping ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito regulador da eletroacupuntura "Jiajie" no inflamasoma NLRP3 relacionado a receptores do tipo NOD na medula espinhal lombar de camundongos com esclerose lateral amiotrófica (ELA) e explorar o mecanismo pelo qual a eletroacupuntura "Jiajie" melhora a disfunção dos membros na ELA. Método: 54 camundongos portadores do gene humano da superóxido dismutase 1 G93A (hSOD1G93A) foram aleatoriamente divididos em grupo modelo, grupo de eletroacupuntura "Jiajie" e grupo de inibidor, com 18 camundongos em cada, enquanto 18 camundongos sem o gene hSOD1G93A foram usados como grupo selvagem. Aos 60 dias de idade, o grupo de eletroacupuntura "Jiajie" recebeu eletroacupuntura na região lombar (L) 1~L2, L5~L6 "Jiajie" (onda contínua, 1 mA, 2 Hz, 20 min/sessão, 2 vezes por semana); o grupo inibidor recebeu injeções intraperitoneais do inibidor de NLRP3 (10 mg/kg, 2 vezes por semana), com intervenções contínuas por 4 semanas. Foram observadas e comparadas as diferenças na sobrevida dos camundongos; o teste de fadiga na barra rotatória avaliou a coordenação motora e a função dos membros; a coloração HE observou alterações morfológicas no músculo gastrocnêmio e a área da seção transversal das fibras musculares para avaliar o grau de atrofia muscular; a coloração de Nissl observou o número de motoneurônios do corno anterior da medula lombar; o método Western blot detectou a expressão proteica de NLRP3, caspase-1, proteína associada à apoptose (ASC), interleucina-1β (IL-1β), interleucina-18 (IL-18) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) na medula lombar; a PCR quantitativa em tempo real detectou a expressão de mRNA de NLRP3, caspase-1, ASC, IL-1β, IL-18 e TNF-α. Resultados: em comparação com o grupo selvagem, o grupo modelo teve redução na sobrevida (P<0.01); a partir das 13 semanas, o tempo na barra rotatória foi reduzido (P<0.05); as fibras musculares gastrocnêmicas estavam significativamente encurtadas, com formato arredondado, aumento do espaço entre as fibras, migração ou extravasamento dos núcleos e diminuição da área da seção transversal das fibras musculares (P<0.01); redução no número de motoneurônios do corno anterior da medula espinhal (P<0.01); aumento da expressão proteica e de mRNA de NLRP3, caspase-1, ASC, IL-1β, IL-18 e TNF-α (P<0.01). Em comparação com o grupo modelo, os grupos inibidor e de eletroacupuntura "Jiajie" apresentaram prolongamento da sobrevida (P<0.01); aumento do tempo na barra rotatória a partir das 13 semanas (P<0.05); bordas das fibras musculares gastrocnêmicas mais regulares e tamanho maior, redução do espaço entre as fibras, menor quantidade de fibras arredondadas, melhora na migração e extravasamento dos núcleos e aumento da área da seção transversal das fibras musculares (P<0.01); maior número de motoneurônios no corno anterior (P<0.01); diminuição da expressão proteica e de mRNA de NLRP3, caspase-1, ASC, IL-1β, IL-18 e TNF-α (P<0.05, P<0.01). Em comparação com o grupo inibidor, o grupo de eletroacupuntura "Jiajie" apresentou aumento do tempo na barra rotatória a partir das 17 semanas (P<0.05); aumento da área da seção transversal das fibras musculares gastrocnêmicas (P<0.05); aumento da expressão proteica e de mRNA de NLRP3, caspase-1 e IL-18 (P<0.05, P<0.01), e diminuição da expressão proteica e de mRNA de TNF-α (P<0.05, P<0.01). Conclusão: A eletroacupuntura "Jiajie" pode melhorar a disfunção dos membros em camundongos com ELA e prolongar sua sobrevida; o mecanismo intrínseco pode estar relacionado à inibição da ativação do inflamasoma NLRP3 na medula lombar, reduzindo assim a resposta neuroinflamatória.

关键词

eletroacupuntura "Jiajie"; esclerose lateral amiotrófica; inflamasoma NLRP3; músculo gastrocnêmio; resposta neuroinflamatória

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