Acupuntura melhora a função ovariana na insuficiência ovariana precoce regulando resposta inflamatória e apoptose via via MEK/ERK

Guo Lihong ,  

Wu Xiaohong ,  

Hao Jianheng ,  

Chang Boya ,  

Liu Liying ,  

摘要

O objetivo é explorar o possível mecanismo pelo qual a acupuntura melhora a função ovariana em ratos com insuficiência ovariana precoce (POI) regulando a resposta inflamatória e a apoptose celular através da via da quinase ativada por mitógeno (MEK)/quinase reguladora de sinal extracelular (ERK). Métodos: Ratos SD machos foram divididos aleatoriamente em três grupos: grupo controle, grupo POI e grupo acupuntura, com 15 ratos em cada grupo. Os grupos POI e acupuntura receberam injeções intraperitoneais contínuas de ciclofosfamida por 15 dias para replicar o modelo POI. O grupo acupuntura recebeu acupuntura nos pontos “Guanyuan” e “Sanyinjiao” bilateralmente, 30 minutos por sessão, uma vez ao dia, durante 3 semanas. Foram observados os ciclos estrais dos ratos; medidos o peso corporal, peso úmido dos ovários e calculado o índice ovariano; realizadas colorações HE para observar a morfologia ovariana e contagem dos folículos em diferentes estágios; detectados os níveis séricos de hormônio antimülleriano (AMH), estradiol (E2), hormônio folículo-estimulante (FSH), interleucinas (IL)-1β, IL-10, fator de necrose tumoral α (TNF-α) e os conteúdos de IL-1β, IL-10, TNF-α nos ovários por ELISA; avaliado o nível de apoptose das células da granulosa ovariana por citometria de fluxo; detectada a expressão de mRNA de MEK1/2, ERK1/2, Bax, Bcl-2, NF-κB p65 e COX-2 por PCR quantitativa em tempo real; detectada a expressão proteica de p-MEK1/2, MEK1/2, p-ERK1/2, ERK1/2, Bax, Bcl-2, NF-κB p65 e COX-2 por Western blot; e detectada expressão da proteína p-ERK1/2 nos ovários por imunofluorescência. Resultados: Em comparação com o grupo controle, o grupo POI apresentou aumento na taxa de distúrbios do ciclo estral (P<0,01), diminuição do peso corporal, peso úmido dos ovários e índice ovariano (P<0,01); desorganização estrutural ovariana, redução no número de folículos primordiais, primários, secundários e maduros (P<0,01), aumento no número de folículos atrésicos (P<0,01); aumento nos níveis séricos de FSH, IL-1β, TNF-α e nos conteúdos ovarianos de IL-1β, TNF-α (P<0,01), diminuição nos níveis séricos de AMH, E2, IL-10 e no conteúdo ovariano de IL-10 (P<0,01); aumento no nível de apoptose das células da granulosa ovariana (P<0,01); aumento na expressão de mRNA de MEK1/2, ERK1/2, Bax, NF-κB p65, COX-2 e redução na expressão de Bcl-2 (P<0,01); aumento na proporção de expressão protéica de p-MEK1/2 para MEK1/2, p-ERK1/2 para ERK1/2 e na expressão protéica de Bax, NF-κB p65, COX-2, diminuição na expressão protéica de Bcl-2 (P<0,01); e aumento na expressão fluorescente de p-ERK1/2 (P<0,01). Em comparação com o grupo POI, esses indicadores reverteram no grupo acupuntura (P<0,01, P<0,05). Conclusão: A acupuntura pode melhorar a função ovariana em ratos com POI, provavelmente regulando a via de sinalização MEK/ERK, reduzindo assim a resposta inflamatória ovariana e inibindo a apoptose das células da granulosa.

关键词

Insuficiência ovariana precoce;Acupuntura;Via de sinalização MEK/ERK;Resposta inflamatória;Apoptose

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