Mecanismo da melhoria da colite ulcerativa pela moxabustão de grão de cevada baseado na morte por cobre

Cui Yaohui ,  

Chang Boya ,  

Xu Huichao ,  

Wang Haijun ,  

Ji Laixi ,  

摘要

Objetivo: explorar o mecanismo de ação da Moxabustão de Grão de Cevada (麦粒灸) na melhora das lesões do tecido do cólon em camundongos com colite ulcerativa (CU) por meio da regulação da via de sinalização da morte dependente de cobre. Métodos: camundongos machos C57BL/6 foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo e grupo tratado com Moxabustão de Grão de Cevada, com 10 camundongos em cada grupo. Para replicar o modelo de CU, os camundongos beberam uma solução de sulfato de dextrano a 3%. No grupo de Moxabustão de Grão de Cevada, o tratamento foi aplicado nos pontos “Zhongwan” e bilateralmente em “Tianshu” e “Shangjuxu”, com 3 estímulos por ponto, uma vez ao dia, durante 7 dias consecutivos. O índice de atividade da doença (DAI) foi avaliado em cada grupo; teste de sangue oculto fecal foi realizado; mediu-se o comprimento do cólon; detectaram-se os níveis séricos de fator de necrose tumoral α (TNF-α), interleucinas (IL)-1β e IL-10 por ELISA; a morfologia patológica do tecido colônico foi observada por coloração HE; a ultraestrutura do cólon foi examinada por microscopia eletrônica de transmissão; o potencial da membrana mitocondrial das células epiteliais do cólon foi detectado por coloração JC-1; os níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) foram medidos por citometria de fluxo; o teor de íons de cobre no tecido do cólon foi medido por método colorimétrico; as expressões de FDX1, DLAT, DLST, LIAS e HSP70 em mRNA e proteínas foram detectadas por PCR quantitativo e Western blot; a expressão positiva de DLAT no cólon foi detectada por imunofluorescência. Resultados: em comparação com o grupo controle, o grupo modelo apresentou aumento do escore DAI, níveis séricos de TNF-α e IL-1β (P<0,01), resultado positivo no teste de sangue oculto fecal, diminuição do comprimento do cólon e níveis de IL-10 (P<0,01); lesão da mucosa do cólon com infiltração inflamatória; dano ultraestrutural com alterações mitocondriais; aumento da proporção de células com potencial mitocondrial baixo, níveis de ROS e teor de íons de cobre (P<0,01); redução na expressão de mRNA e proteínas de FDX1, DLAT, DLST, LIAS (P<0,01), aumento de HSP70 (P<0,01); diminuição da expressão positiva de proteína DLAT (P<0,01). Em comparação com o grupo modelo, o grupo de Moxabustão de Grão de Cevada apresentou redução do escore DAI, níveis séricos de TNF-α e IL-1β (P<0,01); teste de sangue oculto fecal fraco positivo; aumento do comprimento do cólon e níveis de IL-10 (P<0,01); atenuação da lesão patológica da mucosa do cólon e diminuição da infiltração inflamatória; melhora ultraestrutural com redução do edema e vacuolização mitocondrial; redução na proporção de células com potencial mitocondrial baixo, níveis de ROS e teor de íons de cobre (P<0,01); aumento na expressão de mRNA e proteínas de FDX1, DLAT, DLST, LIAS (P<0,01, P<0,05), redução da expressão de HSP70 (P<0,01); aumento da expressão positiva de proteína DLAT (P<0,01). Conclusão: a Moxabustão de Grão de Cevada pode aliviar os sintomas clínicos e danos ao tecido do cólon em camundongos com CU, possivelmente relacionado à regulação da expressão gênica associada à morte por cobre e à melhora da função mitocondrial.

关键词

Colite ulcerativa; moxabustão de grão de cevada; morte por cobre; resposta inflamatória

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